蟬擬青霉殺蟲作用的研究.pdf

1、蟬擬青霉既是名貴中藥，又有較高的致病性。使用蟬擬青霉做材料研究它在生物防治上的開發(fā)價值，具有深遠(yuǎn)的意義。本文研究蟬擬青霉對蠶豆蚜蟲和小菜蛾的殺蟲作用。得出8株蟬擬青霉都具有不同程度的殺蟲作用，其中GZDXIFR4611的殺蟲效果最好。孢子懸液的最高致死率可達(dá)到88.7％。影響昆蟲病原真菌毒力有酶的因素，本研究主要從酶的方面研究它的殺蟲作用。所以對蟬擬青霉蛋白酶、幾丁質(zhì)酶、溶菌酶和酯酶的酶活力研究，在8種菌株中，GZDXIFR4611酯酶

2、的活性明顯比其它三種酶的活力高，初步得到蟬擬青霉酯酶與毒力有一定的相關(guān)性。 為了更好的研究蟬擬青霉酯酶與殺蟲作用的關(guān)系，優(yōu)化產(chǎn)酯酶的條件，從而提高其產(chǎn)率。再進(jìn)行分離純化，對分離物質(zhì)進(jìn)行殺蟲實驗。篩選蟬擬青霉酯酶的最佳液體培養(yǎng)基：可溶性淀粉10g/L，酵母膏7.5g/L，K2HPO40.35g/L，MgSO4.7H2O0.35g/L。GZDXIFR4611在48小時產(chǎn)酯酶最多，酶的最適反應(yīng)溫度為40℃，最適pH為6.5，最適反應(yīng)時

3、間為40mih，在25℃條件下，蟬擬青酶酯酶的半衰期約是58h，蟬擬青霉酯酶在40℃時穩(wěn)定性最高。粗酶液經(jīng)硫酸銨分級鹽析，取40-70％硫酸銨飽和度下的蛋白質(zhì)沉淀溶解，用SephadexG-50柱層析脫鹽，收集高活性管：使用SephadexG-100對酶液進(jìn)行分離純化，也收集高活性管。我們得出酯酶收率是20.4％，純化倍數(shù)是8.05。把分離純化的每個階段得到的酶液進(jìn)行殺蟲實驗，得出通過SephadexG-100過柱收集管的毒力效果最好，