嗜酸乳桿菌增菌培養(yǎng)基的研究.pdf

1、嗜酸乳桿菌作為益生菌的一種，在促進(jìn)人體健康和預(yù)防疾病中具有重要作用，并日益成為乳品科學(xué)研究的熱點(diǎn)。對(duì)于嗜酸乳桿菌，不管是活菌制劑的開(kāi)發(fā)還是嗜酸乳桿菌的分離培養(yǎng)及其酶學(xué)研究、發(fā)酵劑的制備等，都需要良好的增菌培養(yǎng)基，使嗜酸乳桿菌得以大量增殖。因此，優(yōu)化設(shè)計(jì)嗜酸乳桿菌培養(yǎng)基是一項(xiàng)十分重要的基礎(chǔ)研究工作。 為了保證益生菌有較高的活菌數(shù)，必須從選擇合適菌株，改良其生長(zhǎng)環(huán)境條件，添加生長(zhǎng)促進(jìn)物質(zhì)等方面加以?xún)?yōu)化。本研究首先通過(guò)耐酸、耐膽汁鹽試

2、驗(yàn)、抑菌試驗(yàn)和生長(zhǎng)動(dòng)力及產(chǎn)酸試驗(yàn)，對(duì)供試的三株嗜酸乳桿菌進(jìn)行對(duì)比，從中篩選出具有優(yōu)良形狀的菌株。并根據(jù)嗜酸乳桿菌的生長(zhǎng)代謝特性和營(yíng)養(yǎng)需求，對(duì)其增菌培養(yǎng)基進(jìn)行進(jìn)一步研究，試驗(yàn)選用MRS作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，在MRS基礎(chǔ)上分別添加菊粉、乳糖、乳清粉、酪蛋白水解物、番茄汁、胡蘿卜汁和啤酒七種增殖因子，每個(gè)增殖因子三個(gè)水平，研究了在MRS培養(yǎng)基中添加不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)的影響，用以確定每個(gè)增殖因子的最佳促生長(zhǎng)效果和最佳水平，并對(duì)七種增殖因子進(jìn)

3、行對(duì)比，結(jié)果表明增殖因子的最佳促生長(zhǎng)水平分別為：菊粉(代替MRS中50％的葡萄糖)、乳糖0.5％、乳清粉1.8％、酪蛋白水解物0.9％、番茄汁15％、胡蘿卜汁15％，啤酒15％。進(jìn)行對(duì)比的結(jié)果顯示在MRS培養(yǎng)基中添加菊粉、乳清粉、酪蛋白水解物、胡蘿卜汁可顯著促進(jìn)嗜酸乳桿菌的細(xì)胞生長(zhǎng)，而乳糖、西紅柿汁、啤酒的添加相對(duì)而言對(duì)菌的增殖影響不大；進(jìn)一步采用正交試驗(yàn)優(yōu)化篩選了嗜酸乳桿菌的增菌培養(yǎng)基。結(jié)果表明：利用L93^4正交試驗(yàn)篩選出增殖因子的

4、最佳配比為：乳清粉1.5％、菊粉代替MRS中50％葡萄糖、酪蛋白水解物1.2％，胡蘿卜汁10％。最后使用優(yōu)化出的增菌培養(yǎng)基測(cè)定生長(zhǎng)曲線，同時(shí)測(cè)定pH和滴定酸度的變化，確定增菌培養(yǎng)終止時(shí)間為10小時(shí)，此時(shí)活菌數(shù)可達(dá)2.59×1010cfu/mL，較對(duì)照培養(yǎng)基中的菌數(shù)提高22.72倍。 試驗(yàn)通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)的參數(shù)，優(yōu)選培養(yǎng)工藝條件，為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。其中包括：調(diào)酸情況下培養(yǎng)過(guò)程中pH的確定、中和劑的選擇、供氧情況對(duì)菌體生長(zhǎng)的影