芪丹中藥提取物抗腦缺血—再灌注損傷作用及其機(jī)制研究.pdf

1、芪丹中藥提取物(QDPTP)是按照中醫(yī)理論組方、經(jīng)現(xiàn)代工藝加工而成的復(fù)方中藥提取物。該組方中黃芪為君藥，丹參、川芎和紅花為臣藥，銀杏葉、三七和紅景天為佐使藥。已有研究表明QDPTP具有抗心肌缺血-再灌注損傷的作用。本課題分別采用大鼠局灶性和全腦缺血-再灌注模型，研究QDPTP的抗大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血-再灌注損傷作用及機(jī)制，為此藥的開(kāi)發(fā)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 一、QDPTP抗腦缺血-再灌注損傷作用 1.QDPTP對(duì)局灶性腦缺血-再

2、灌注大鼠神經(jīng)功能的影響SD大鼠，給生理鹽水(10ml/kg/d，7d，i.g.)、QDPTP低、中、高劑量(450、900、1800mg/kg/d，7d，i.g.)，川芎嗪(33mg/kg/d，缺血前30min，i.v.)。阻塞右側(cè)大腦中動(dòng)脈造成局灶性缺血模型，2小時(shí)后再灌注，觀察QDPTP對(duì)再灌注后神經(jīng)功能的影響。模型組、QDPTP低、中、高劑量組和川芎嗪組的神經(jīng)功能缺陷等級(jí)評(píng)分分別為3.7±1.2、1.4±0.5(vs模型組，P＜0

3、.01)、1.8±0.4(P＜0.01)、1.8±0.5(P＜0.01)和1.9±0.5(P＜0.01)。此結(jié)果表明：QDPTP低、中、高劑量組均能顯著改善缺血-再灌注引起的大鼠神經(jīng)功能缺陷癥狀。 2.QDPTP對(duì)大鼠局灶性腦缺血-再灌注損傷腦梗死范圍的影響 在大鼠局灶性腦缺血-再灌注損傷模型，采用TTC染色，見(jiàn)模型組、QDPTP低、中、高劑量組和川芎嗪組的腦梗死范圍分別為20.9±7.3(％)、6.6±4.4(％)、6

4、.4±4.8(％)、4.4±2.6(％)、和6.6±4.3(％)，所有用藥組均明顯縮小腦梗死范圍(P＜0.01，vs模型組)。 3.QDPTP對(duì)大鼠局灶性腦缺血-再灌注損傷腦含水量和腦指數(shù)的影響 在大鼠局灶性腦缺血-再灌注模型，模型組動(dòng)物腦組織含水量(81.8±0.8，％)較偽手術(shù)組明顯增加(P＜0.01)；各給藥組均明顯降低局灶性缺血-再灌注引起的腦組織含水量升高(P＜0.01或P＜0.05)，分別為：QDPTP低劑量

5、(78.8±1.4，％)、中劑量(78.1±1.8，％)、高劑量(80.5±0.6，％)和川芎嗪(79.0±2.0，％)。與模型組比較，各給藥組腦指數(shù)均表現(xiàn)出降低的趨勢(shì)，但統(tǒng)計(jì)學(xué)意義不顯著。 二、QDPTP抗腦缺血-再灌注損傷的機(jī)制研究 (一)QDPTP對(duì)大鼠全腦缺血-再灌注所致氧化損傷和炎癥反應(yīng)的影響 1.制備大鼠全腦缺血-再灌注損傷模型和實(shí)驗(yàn)分組 采用Pulsinelli四血管閉塞的方法略加改良建立大

6、鼠急性全腦缺血-再灌注損傷模型。SD大鼠，隨機(jī)分為偽手術(shù)組、模型組(NS，10ml/kg/d，7d，i.g.)、QDPTP低、中劑量組(450、900mg/kg/d，7d，i.g.)，川芎嗪組(33mg/kg，i.v.，缺血前30min和再灌后各1次)。 2.QDPTP對(duì)全腦缺血-再灌注大鼠腦組織SOD活性和MDA含量的影響 采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD活力，采用硫代巴比妥顯色法測(cè)定MDA含量，組織蛋白測(cè)定用考馬斯亮藍(lán)蛋

7、白測(cè)定法。模型組中脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA的含量(4.53±0.92nmol/mgprot)顯著升高(P＜0.01vs偽手術(shù)組)，過(guò)氧化物歧化酶SOD活性(79.4±7.3U/mgprot)顯著降低(P＜0.01vs偽手術(shù)組)；各給藥組均能顯著減少M(fèi)DA含量(P＜0.01vs模型組)，增加SOD活性(P＜0.01vs模型組)，分別為：QDPTP低劑量(2.10±0.17，116.9±11.2)、中劑量(2.35±0.09，111.5±6.2

8、)和川芎嗪(1.66±0.11，95.6±13.3)。 3.QDPTP對(duì)全腦缺血-再灌注大鼠腦組織及血清IL1-β含量的影響 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定。結(jié)果表明：模型組腦組織及血清IL1-β含量分別為1006.4±247.1pg/ml和370.8±76.6pg/ml，與之相比，QDPTP中劑量(550.7±99.8，268±64.6)組中腦組織及血清中IL1-β的含量顯著降低(P＜0.01)，川芎嗪腦也明顯減少組

9、織IL1-β的含量(627.8±144.7，P＜0.05)。 (二)QDPTP對(duì)麻醉大鼠局部腦血流量和動(dòng)脈血壓的影響 采用激光多普勒血流儀測(cè)量大鼠軟腦膜局部的血灌注量，其被視為局部的腦血流量(rCBF)。單次十二指腸給予生理鹽水(10ml/kg)、QDPTP低、中、高劑量(450、900、1800mg/kg)，尼莫地平(20mg/kg)，復(fù)方丹參滴丸(60mg/kg)，或靜脈注射川芎嗪(33mg/kg)，記錄給藥前后rC

10、BF的變化。采用電生理記錄儀監(jiān)測(cè)給藥前后外周動(dòng)脈平均收縮壓、平均舒張壓、平均壓的變化。結(jié)果表明：持續(xù)觀察120min，溶劑對(duì)照組的腦血流量和血壓各參數(shù)無(wú)明顯變化。QDPTP低、中、高劑量、川芎嗪、尼莫地平和復(fù)方丹參滴丸均能不同程度增加大鼠局部腦血流(P＜0.01或P＜0.05)，外周動(dòng)脈血壓出現(xiàn)不同程度的降低。 結(jié)論 1.QDPTP可減輕缺血-再灌注引起的神經(jīng)功能損傷，減輕腦水腫，縮小腦梗死范圍。 2.QDPTP