杭白菊提取物抗缺血心肌損傷的作用研究.pdf

1、背景：缺血一定時(shí)間的心肌在重新恢復(fù)血液供應(yīng)后，心肌不一定都會(huì)恢復(fù)其正常功能和結(jié)構(gòu)，反而出現(xiàn)心肌細(xì)胞損傷加重的表現(xiàn)，如心律失常、出血性壞死、梗死面積擴(kuò)大、心功能低下等現(xiàn)象，即所謂心肌缺血-再灌注損傷。這也是目前臨床冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)、經(jīng)皮冠脈腔內(nèi)成形術(shù)及溶栓術(shù)等心臟介入性治療常見(jiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥。因此，研究心肌缺血-再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制及如何減輕心肌缺血-再灌注損傷已成為防治缺血性心臟病和臨床心臟介入性治療的一個(gè)重要課題。 杭白菊(Den

2、dranthemamorifolium(Ramat.)Tzvel.，DM)是浙江馳名中外的地道藥材，為“浙八味”之一，有清熱、平肝、明目功能。根據(jù)報(bào)道，菊花對(duì)冠心病、高血壓有治療作用，其水煎醇沉劑對(duì)離體和在體心臟有明顯的擴(kuò)張冠脈及增加冠脈流量的作用，并減慢心率，影響心肌收縮力。對(duì)電刺激兔中樞神經(jīng)引起的缺血性心電圖ST段壓低有減輕作用，并能使兔心的室顫消除而恢復(fù)正常搏動(dòng)。但杭白菊對(duì)心肌缺血引起的心肌功能改變的相關(guān)機(jī)制研究甚少。 目

3、的：應(yīng)用在體和離體不同心肌缺血模型探討杭白菊提取物對(duì)缺血心肌損傷的影響及其相關(guān)機(jī)制。 方法：1、在體大鼠心肌缺血模型大鼠麻醉固定，暴露心臟后，絲線結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支根部。于結(jié)扎2h后，頸總動(dòng)脈取血，測(cè)定血清LDH和CK。摘取心臟，以TTC染色測(cè)定心肌梗死面積。 2、垂體后葉素誘發(fā)的大鼠急性缺血心肌ST-T的改變記錄大鼠麻醉固定后，將針狀電極插入皮下，記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖。經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素0.6u/kg。連續(xù)記錄

4、心電圖30min，分析心電圖ST-T改變情況。 3、在體犬心肌缺血模型動(dòng)物麻醉固定后，實(shí)施左胸廓開(kāi)胸術(shù)，用4號(hào)絲線結(jié)扎冠脈左前降支中下1/3交界處。于結(jié)扎前和結(jié)扎后各時(shí)點(diǎn)進(jìn)行心外膜電圖標(biāo)測(cè)，分析心律失常發(fā)生情況并進(jìn)行心律失常評(píng)分，于結(jié)扎前和結(jié)扎后1、2、3小時(shí)采血測(cè)定LDH和CK。觀察結(jié)束后，放血處死，取心臟，并測(cè)定心肌梗死區(qū)重量和面積。 4、心律失常評(píng)分法采用Curtis和Walker(1988)心律失常評(píng)分法對(duì)心律失

5、常嚴(yán)重程度進(jìn)行定量分析。 5、離體心臟Langendorff灌流及缺血-再灌注模型迅速取出心臟，轉(zhuǎn)移、固定于Langendorff灌流裝置，以改良Krebs-Henseleit液(K-H液)行常規(guī)恒壓灌流(76mmHg)。用絲線結(jié)扎冠脈的左前降支(LAD)120min。用試劑盒檢測(cè)心肌超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)，作為心肌損害和膜脂質(zhì)過(guò)氧化的指標(biāo)。 結(jié)果：1、在體大鼠冠脈結(jié)扎引起的心肌缺血模型(1)杭白菊提

6、取物對(duì)大鼠心肌梗死面積的影響：與冠脈結(jié)扎模型組比較，冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎2小時(shí)后，三個(gè)劑量的杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組均有明顯的降低心肌梗死面積的作用。 (2)杭白菊提取物對(duì)大鼠心肌缺血后血清LDH和CK的影響：與冠脈結(jié)扎模型組比較，冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎后2小時(shí)，三個(gè)劑量的杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后血清LDH的作用，中、高兩個(gè)劑量的杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后血清CK的

7、作用。 2、杭白菊提取物對(duì)垂體后葉素誘發(fā)的大鼠急性缺血心肌ST-T改變的影響與模型對(duì)照組比較，注射垂體后葉素后10s和15s，三個(gè)劑量的杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組由垂體后葉素引起的急性心肌缺血性ST-T抬高明顯降低。 3、杭白菊提取物對(duì)離體大鼠心臟缺血-再灌后心肌MDA和SOD的影響單純?nèi)毖?再灌注組心肌SOD含量與假手術(shù)組相比明顯降低，MDA含量升高；杭白菊+缺血-再灌注組心肌SOD含量明顯高于單獨(dú)缺血-再灌

8、注組，MDA含量較單獨(dú)缺血-再灌注組顯著降低。 4、在體犬冠脈結(jié)扎引起的心肌缺血模型(1)杭白菊提取物對(duì)犬急性心肌缺血引起的心肌梗死重量/面積的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較，冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎3小時(shí)后，三個(gè)劑量的杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組均有明顯的降低心肌梗死重量/面積的作用(P＜0.01)。銀杏葉提取物組心肌梗死重量和面積分別為模型對(duì)照組的28.75％和27.67％，高劑量杭白菊提取物組與陽(yáng)性藥組效果相當(dāng)。 (2

9、)杭白菊提取物對(duì)犬急性心肌缺血后血清LDH和CK的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較，冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎后的3小時(shí)內(nèi)，三個(gè)劑量的杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后60min、120min和180min三個(gè)時(shí)點(diǎn)的冠狀竇血血清LDH的作用。銀杏葉提取物組在結(jié)扎后60min、120min和180min冠狀竇血血清LDH量分別為模型對(duì)照組的72.44％、74.36％和67.83％，高劑量杭白菊提取物組與陽(yáng)性藥組效果相當(dāng)。 與冠

10、脈結(jié)扎模型組比較，冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎后的3小時(shí)內(nèi)，低劑量杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后60min、120min和180min三個(gè)時(shí)點(diǎn)的冠狀竇血血清CK的作用；中、高劑量杭白菊提取物組明顯降低結(jié)扎后60min和180min時(shí)冠狀竇血血清CK，在結(jié)扎后120min時(shí)點(diǎn)雖然有降低CK的趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 (3)杭白菊提取物對(duì)犬冠脈結(jié)扎后心外膜電圖標(biāo)測(cè)心肌缺血范圍和程度的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較，冠狀動(dòng)脈前降

11、支結(jié)扎后的3小時(shí)內(nèi)，三個(gè)劑量的杭白菊提取物組和陽(yáng)性藥銀杏葉提取物組對(duì)犬急性心肌缺血引起的ST段升高總和(∑ST)及其冠脈結(jié)扎前后∑ST差值(△∑ST)、ST段升高大于2mV的標(biāo)測(cè)點(diǎn)數(shù)(NST)及其標(biāo)測(cè)點(diǎn)差值(△NST)有明顯的降低作用。 (4)杭白菊提取物對(duì)犬冠脈結(jié)扎后心律失常發(fā)生嚴(yán)重程度的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較，冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎后的3小時(shí)內(nèi)，中、高劑量的杭白菊提取物組對(duì)犬急性心肌缺血期間的心律失常評(píng)分有明顯的降低作用，未觀