工業(yè)釀酒酵母F菌株ald-,6-基因敲除的研究.pdf

1、乙酸作為揮發(fā)酸的重要組成部分，含量過多是造成啤酒偏酸的主要因素。釀酒酵母染色體上ald?；蚓幋a的乙醛脫氫酶是控制乙酸發(fā)酵的關鍵酶，乙醛脫氫酶的活性高時乙酸產生的量多。本論文采用敲除釀酒酵母染色體上部分或全部ald<,6>基因的方法得到ald<,6>基因缺陷型改良菌株。改良后的釀酒酵母在釀造啤酒時能夠有效的控制乙酸的產量。 本研究采用PCR法從質粒pFA6a-kanMX4及釀酒酵母染色體上構建了兩端帶有釀酒酵母ald<,6>基因

2、同源序列的具有G418抗性的外源基因片段。利用完整細胞轉化法將構建的外源基因片段導入工業(yè)釀酒酵母F細胞內，外源基因片段通過同源重組而整合于釀酒酵母染色體，破壞釀酒酵母ald<,6>基因從而得到ald<,6>基因敲除菌株。 通過發(fā)酵試驗，比較ald<,6>基因敲除菌株Cl和原始釀酒酵母F的生長性狀、發(fā)酵性能及啤酒中乙醛、雙乙酰、高級醇及乙酸等成份的含量，發(fā)現(xiàn)ald<,6>基因敲除菌株對于發(fā)酵液中的雙乙酰還原能力比原始菌株強，乙醛脫