健中愈瘍片對胃潰瘍線粒體DNA修復(fù)酶調(diào)控機(jī)制的臨床與實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、一、目的： 胃潰瘍是針對胃粘膜的侵襲因素超過防御因素和修復(fù)能力的結(jié)果。胃潰瘍的粘膜修復(fù)，是指胃粘膜對有害因素如對食物、幽門螺桿菌感染、乙醇、酸、膽鹽、非固醇類抗炎藥、應(yīng)激及溫度(過冷、過熱)等造成粘膜損傷的修復(fù)能力。導(dǎo)師劉友章教授通過多年對胃潰瘍病的潛心研究，研制出了健脾益氣中成藥健中愈瘍片，臨床實(shí)踐證明其對頑固難愈的胃潰瘍具有極佳的療效，中醫(yī)藥治療胃潰瘍顯示出了良好的效果與優(yōu)勢，而健脾益氣則是中醫(yī)藥治療胃粘膜損傷的主要治則。中

2、藥對胃粘膜的保護(hù)作用往往是多環(huán)節(jié)、多途徑的。近年來關(guān)于線粒體DNA修復(fù)的研究已經(jīng)形成了一個(gè)十分活躍的領(lǐng)域，胃粘膜線粒體DNA的完整性和自我修復(fù)能力對胃潰瘍的康復(fù)十分重要。這方面的研究，拓展了我們對胃潰瘍胃粘膜損傷和自我修復(fù)認(rèn)識(shí)的深度和廣度，使我們不再單單從外部因素來研究胃潰瘍的修復(fù)，而是從外部損傷和自身修復(fù)是否平衡的角度來重新看待這個(gè)問題。但是中藥和線粒體DNA修復(fù)酶之間是否有關(guān)系及它們之間是如何協(xié)調(diào)作用的，還需要進(jìn)一步更深入的研究，因

3、此我們的課題通過實(shí)驗(yàn)來揭示健脾益氣中藥對線粒體DNA修復(fù)酶的干預(yù)、調(diào)控作用，來進(jìn)一步明確中藥治療胃潰瘍的機(jī)制并找到中藥新的作用靶點(diǎn)。 二、方法： 本課題采用臨床觀察和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，用健脾益氣為治則的健中愈瘍片治療胃潰瘍，并與粘膜保護(hù)劑胃舒平以及H<,2>受體拮抗劑法莫替丁對胃粘膜線粒體8一氧鳥嘌呤DNA糖基化酶、胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶、3—甲基腺嘌呤DNA糖基化酶等DNA修復(fù)酶的調(diào)控作用和對胃痛和脾虛兩方面的治療效果以

4、及潰瘍愈合質(zhì)量等進(jìn)行對比，在臨床方面測定胃痛等級(jí)的評分和脾虛等級(jí)的評分以及綜合療效，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面測定大鼠體重、單位時(shí)間扭動(dòng)次數(shù)、懸吊時(shí)間、胃潰瘍指數(shù)、胃粘膜微循環(huán)狀況的B/(R+G+B)比值等，從分子水平探討復(fù)方健脾益氣中藥在胃粘膜損傷修復(fù)過程中對線粒體修復(fù)酶的調(diào)控機(jī)制及對胃潰瘍的治療效果。 三、結(jié)果： (一)臨床觀察結(jié)果： 1．在線粒體DNA修復(fù)酶方面： 正常組胃粘膜8—氧鳥嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧

5、啶乙二醇DNA糖基化酶含量最低，而胃潰瘍組8—氧鳥嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量很高，與正常組相比具有極顯著差異(P<0.01)；胃舒平組8—氧鳥嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量與胃潰瘍組沒有明顯差異(P>0.05)；法莫替丁組8—氧鳥嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量較胃潰瘍組極顯著降低(P<0.01)，但仍極顯著地高于正常組(P<0.01)；健中愈瘍片組8—氧鳥嘌呤DNA糖

6、基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量最高，與其它四組均有極顯著差異(P<0.01)。 2.胃痛評分： 治療前正常組與其它四組相比具有極顯著差異(P<0.01)，而其它四組之間比較無顯著差異(P>0.05)。在治療后健中愈瘍片組與法莫替丁組胃痛評分最低，二者相比沒有差異(P>0.05)；而胃舒平組胃痛評分較低，與胃潰瘍組相比具有極顯著差異(P<0.01)，但與健中愈瘍片及法莫替丁組相比也具有極顯著差異(P<0.01)。

7、在治療前后胃痛評分差值的比較上，健中愈瘍片組與法莫替丁組相比沒有差異(P>0.05)，而胃舒平組與健中愈瘍片相比具有顯著差異(P<0.05)，與法莫替丁組相比具有極顯著差異(P<0.01)。 3.脾虛癥狀： 治療前除正常組外，其余各組的脾虛等級(jí)比例處于均衡狀態(tài)，而經(jīng)過治療后，健中愈瘍片脾虛癥狀的改變最為明顯，與其它四組相比均具有極顯著差異(P<0.01)，而法莫替丁組與胃舒平組與胃潰瘍組相比具有極顯著差異(P<0.01)

8、，但法莫替丁組與胃舒平組相比沒有顯著差異(P>0.05)。 4.臨床療效： 臨床療效綜合了胃痛與脾虛的治療結(jié)果，對藥物的功效進(jìn)行了總體評價(jià)。結(jié)果顯示：健中愈瘍片、法莫替丁和胃舒平組與胃潰瘍組比較，均具有極顯著差異(P<0.01)，其中胃舒平組與健中愈瘍片組比較具有顯著差異(P<0.05)，健中愈瘍片組與法莫替丁組相比沒有顯著差異(P>0.05)。 (二)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1.在改善胃痛方面的結(jié)果：

9、扭動(dòng)次數(shù)主要用來衡量胃痛的程度。模型組扭動(dòng)次數(shù)最多，與正常組相比具有極顯著的差異(P<0.01)，而經(jīng)過治療后，各組的扭動(dòng)次數(shù)均有所下降。健中愈瘍片組、法莫替丁組和胃舒平組三組與模型組比較均具有極顯著差異(P<0.01)；健中愈瘍片組、法莫替丁組和胃舒平組比較，扭動(dòng)次數(shù)具有顯著差異(P<0.05)，而健中愈瘍片組和法莫替丁組比較沒有差異(P>0.05)。 2.在改善脾虛證候方面的結(jié)果： 體重變化和懸吊時(shí)間主要用來說明對脾

10、虛證候的改善情況。模型組體重和懸吊時(shí)間與正常組比較，明顯下降，具有極顯著的差異(P<0.01)，而經(jīng)過治療后，法莫替丁組、胃舒平組和模型組三個(gè)組之間比較，體重和懸吊時(shí)間均沒有差異(P>0.05)，而健中愈瘍片組和正常組相比，體重和懸吊時(shí)間均沒有差異(P>0.05)，和模型組相比，體重和懸吊時(shí)間具有極顯著差異(P<0.01)。 3.潰瘍愈合質(zhì)量： 3.1 胃粘膜損傷潰瘍指數(shù)評分是胃潰瘍愈合質(zhì)量的直接指標(biāo)。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，模

11、型組潰瘍指數(shù)最高，與正常組相比具有極顯著差異(P<0.01)，經(jīng)用藥后，各組的潰瘍指數(shù)均有所下降，但與正常組相比仍然具有極顯著差異(P<0.01)；健中愈瘍片、法莫替丁組和胃舒平組比較，潰瘍指數(shù)具有顯著差異(P<0.05)，而健中愈瘍片和法莫替丁組比較，潰瘍指數(shù)沒有差異(P>0.05)。 3.2 胃粘膜微循環(huán)狀態(tài)的B/(R+G+B)值是胃潰瘍愈合質(zhì)量的間接指標(biāo)。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，模型組較正常組極顯著降低(P<0.01)，而用藥后，

12、各組的B/(R+G+B)值均有升高，其中胃舒平組和法莫替丁組相比沒有顯著差異(P>0.05)，但二者與正常組相比均有極顯著差異(P<0.01)；而健中愈瘍片組和正常組相比B/(R+G+B)值沒有顯著差異(P>0.05)，而與胃舒平與法莫替丁具有極顯著差異(P<0.01)。 4.在線粒體DNA修復(fù)酶方面： 正常組胃粘膜3—甲基腺嘌呤DNA糖基化酶含量最低，而胃潰瘍組3—甲基腺嘌呤DNA糖基化酶含量很高，與正常組相比具有極顯

13、著差異(P<0.01)；胃舒平組3—甲基腺嘌呤DNA糖基化酶含量與胃潰瘍組沒有明顯差異(P>0.05)；法莫替丁組3—甲基腺嘌呤DNA 糖基化酶含量較胃潰瘍組極顯著降低(P<0.01)，但仍極顯著地高于正常組(P<0.01)；健中愈瘍片組3—甲基腺嘌呤3NA糖基化酶含量最高，與其它四組均有極顯著差異(P<0.01)。 四、結(jié)論： (一)在胃痛治療方面：健中愈瘍片、法莫替丁、胃舒平對于改善胃痛癥狀均具有明顯效果。但健中愈瘍

14、片和法莫替丁對胃痛的治療效果基本相同，對改善胃痛的療效都極為顯著，均優(yōu)于胃舒平。 (二)在脾虛證治療方面：法莫替丁、胃舒平對脾虛證候的治療效果差，基本不具備健脾益氣的作用，而健中愈瘍片改善脾虛癥狀的效果是最好的。 (三)在潰瘍愈合質(zhì)量方面：健中愈瘍片和法莫替丁對胃潰瘍愈合的療效基本相同，二者對胃潰瘍的治療康復(fù)作用優(yōu)于胃舒平，并且健中愈瘍片對胃粘膜微循環(huán)的改善是最顯著的，基本恢復(fù)到了正常水平，效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于胃舒平與法莫替丁。

15、 (四)在臨床療效方面：三種藥物對胃潰瘍均有明顯的治療作用，健中愈瘍片和法莫替丁的綜合療效基本相同。但健中愈瘍片的療效優(yōu)于胃舒平。 (五)在作用機(jī)制上：正常胃粘膜因?yàn)闆]有受到損害，所以胃粘膜沒有進(jìn)行線粒體DNA的自我修復(fù)；而胃潰瘍在胃粘膜受到損害后，線粒體DNA修復(fù)酶對受損DNA進(jìn)行了修復(fù)；胃舒平對胃粘膜主要是物理性保護(hù)作用，與線粒體DNA修復(fù)酶的自我修復(fù)作用關(guān)系不大；法莫替丁抑制胃酸分泌，減少了有害因素，所以線粒體DN

16、A修復(fù)酶的含量反饋性地降低，但仍然進(jìn)行著自我修復(fù)；而健中愈瘍片極大地提高了線粒體DNA修復(fù)酶對受損胃粘膜的自我修復(fù)機(jī)制，促進(jìn)了潰瘍的自我愈合。 (六)總體評價(jià)：健中愈瘍片治療胃潰瘍，具有極好的止痛和改善脾虛證候的效果，在止痛作用上與法莫替丁基本相同，但在改善脾虛證候和改善胃粘膜微循環(huán)上，具備了優(yōu)于西藥的效果。在作用機(jī)理上健中愈瘍片極大地提高了線粒體DNA修復(fù)酶對受損胃粘膜的自我修復(fù)機(jī)制，促進(jìn)了潰瘍的自我愈合，這是和西藥作用機(jī)制不

17、同的方面，西藥治療側(cè)重于對有害因素的消除和抵御，而健中愈瘍片側(cè)重于自身的修復(fù)，即符合中醫(yī)理論中“扶正驅(qū)邪”、“正氣存內(nèi)，邪不可干”的觀點(diǎn)。所以我們的課題提供了中藥優(yōu)越療效的客觀事實(shí)及顯示了中醫(yī)藥的臨床優(yōu)勢。我們知道，中藥的作用機(jī)理是多途徑、多方面的，我們的課題僅僅證明了對線粒體DNA修復(fù)酶的調(diào)控和影響是健中愈瘍片治療胃潰瘍的機(jī)制和作用靶點(diǎn)之一，希望今后隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，我們能用更多的實(shí)驗(yàn)來尋找到中醫(yī)藥治療疾病的本質(zhì)和機(jī)制，為中醫(yī)