細(xì)胞色素P450同工酶與含馬兜鈴酸中藥毒性的關(guān)系研究.pdf

1、本文中選擇幾種細(xì)胞色素P450酶的誘導(dǎo)劑—苯巴比妥(PB)(典型的CYP總酶誘導(dǎo)劑)、奧美拉唑(OM)(典型的CYP1A誘導(dǎo)劑)和利福平(RFP)(典型的CYP3A誘導(dǎo)劑)與含馬兜鈴酸中藥關(guān)木通聯(lián)用研究這些誘導(dǎo)劑對其毒性的影響，探討被誘導(dǎo)的細(xì)胞色素P450酶與含馬兜鈴酸中藥關(guān)木通毒性的關(guān)系。 方法一、根據(jù)T.C.chou報(bào)道的半數(shù)效應(yīng)評價(jià)聯(lián)合用藥的拮抗或協(xié)同作用的方法，研究關(guān)木通提取物(GMT)和P450酶誘導(dǎo)劑單劑量聯(lián)合一次用

2、藥對小鼠的急性毒性。 二、采用序貫用藥研究對小鼠的急性毒性。 三、P450酶誘導(dǎo)劑和GMT聯(lián)合用藥，觀察藥物對大鼠的毒性，測定肝臟細(xì)胞色素P450酶活性或含量。 四、P450酶誘導(dǎo)劑和GMT聯(lián)合用藥，利用免疫組化法觀察小鼠肝臟細(xì)胞色素P450酶的表達(dá)情況。 結(jié)果：1.關(guān)木通提取物(GMT)分別與苯巴比妥、奧美拉唑、利福平單劑量聯(lián)合用藥對小鼠的急性毒性研究 (1)GMT和誘導(dǎo)劑單劑量聯(lián)合用藥對小鼠的

3、急性毒性單次灌胃給藥即可引起小鼠的死亡，根據(jù)幾種藥物引起動(dòng)物死亡的時(shí)程和腎功能檢查結(jié)果分析，GMT引起動(dòng)物死亡主要與腎毒性有關(guān)，而PB、RFP的急性致死性與腎臟毒性關(guān)系不大。 (2)序貫用藥,這種聯(lián)合用藥方式中所造成的動(dòng)物死亡主要與GMT有關(guān)。 比較兩種聯(lián)合用藥試驗(yàn)的方法，后一種方式(序貫用藥)，能更合理地預(yù)測P450酶對關(guān)木通腎臟毒性的影響。 2.大鼠肝臟CYP450同工酶的誘導(dǎo)及其對關(guān)木通提取物毒性的影響。G

4、MT(2.2g提取物/kg和1.1g提取物/kg)分別與誘導(dǎo)劑給大鼠聯(lián)合灌胃給藥，觀察動(dòng)物的腎臟毒性以及測定肝微粒體的P450酶(CYP總酶、NADPH-P450還原酶、CYP1A、2E、3A)的活性或含量。 3.P450誘導(dǎo)劑與關(guān)木通聯(lián)合用藥對小鼠肝臟P450同工酶的影響。采用GMT與PB、OM、RFP單獨(dú)和聯(lián)合用藥一周，利用免疫組化法觀察小鼠肝臟NADP：P450還原酶、CYP1A1、CYP2E、CYP3A4的表達(dá)情況。

5、 結(jié)論:1馬兜鈴酸腎毒性存在明顯的雌雄性別差異，可能與體內(nèi)CYP450酶含量存在差異有關(guān)。 2.誘導(dǎo)劑與GMT聯(lián)合用藥時(shí)OM可以減輕GMT的腎臟毒性；RFP可以增加GMT的腎臟毒性；在小鼠和大鼠實(shí)驗(yàn)中PB對GMT毒性的影響不一致，PB減輕GMT對小鼠的急性毒性，對大鼠既未減輕GMT毒性也未明顯增加其毒性。 3.體內(nèi)CYP450酶的變化對GMT的毒性產(chǎn)生一定的影響，CYP3A4活性增高與GMT腎臟毒性程度加重有關(guān)。推測

6、對P450同工酶具有誘導(dǎo)作用的藥物與含馬兜鈴酸藥物聯(lián)合用藥可以影響馬兜鈴酸的毒性，臨床應(yīng)用時(shí)應(yīng)予以重視。 4.GMT對CYP450酶(CYP1A1、CYP3A4以及NADP：P450還原酶)有誘導(dǎo)作用，所以GMT本身也是一種P450酶的誘導(dǎo)劑。因此，GMT對其他藥物的代謝也可能會(huì)造成潛在的影響，聯(lián)合用藥時(shí)也應(yīng)考慮GMT對其他藥物代謝的影響。 本研究中有部分研究結(jié)果在大、小鼠上表明不完全一致，是否是由于大、小鼠體內(nèi)P450