脆性組氨酸三聯(lián)體（FHIT）在皮膚良惡性腫瘤中的表達及意義.pdf

1、目的：鱗狀細胞癌(squamouscellcarcinoma,SCC)、Bowen病(Bowen'sdisease，BOD)、光線性角化病(actinickeratosis，AK)是常見的非黑素瘤皮膚腫瘤(non-melanomaskincancers，NMSC)。這些皮膚腫瘤的病因及發(fā)病機制至今尚未闡明。目前研究表明，皮膚腫瘤的發(fā)病與紫外線照射、人類乳頭瘤病毒(HPV)感染，癌基因、抑癌基因等多種因素有關。大部分皮膚癌是因暴露于環(huán)境中

2、的日光所引起的，淺膚色或DNA修復功能低下是目光誘發(fā)皮膚癌的遺傳易感性因素。脆性組氨酸三聯(lián)體(FHIT)基因是1996年Ohta等利用差異顯示分析探針和外顯捕獲法于人3號染色體短臂(3p14.2)處發(fā)現(xiàn)的一個抑癌基因，此基因跨越人類染色體的脆性部位FRA3B，其缺失與許多腫瘤的發(fā)生密切相關。另有研究認為FHIT缺失可能與環(huán)境條件有聯(lián)系。鑒于皮膚腫瘤與FHIT缺失均與環(huán)境條件密切相關，本實驗擬對SCC、BOD、AK及正常皮膚中的FHIT基

3、因蛋白進行檢測，以探討FHIT基因在皮膚腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用，為皮膚腫瘤的基因治療提供一種新的思路。 方法：皮膚良惡性腫瘤患者皮損標本來源于1999年6月～2005年6月河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院及哈勵遜國際和平醫(yī)院皮膚科門診患者，共計68例。均經(jīng)組織病理確診。其中鱗狀細胞癌20例，男11例，女9例，年齡38～90歲，平均(58.2±13.6)歲，病程平均3.9年。鮑溫病16例，男8例，女8例，年齡45～80歲，平均(63.3±8.

4、1)歲，病程平均6.1年。光線性角化病16例，男9例，女7例，年齡38～70歲，平均(58.4±8.5)歲，病程平均3.0年。所有患者均無其他系統(tǒng)性疾病。取患者皮損組織用于常規(guī)病理分析，并用免疫組化法及流式細胞術檢測皮損中FHIT的表達水平，同時用流式細胞術檢測皮損中細胞周期、DNA含量及倍體。選取河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院外科16例外傷手術患者的健康皮膚作為正常對照，且年齡、性別及取材部位與實驗組患者相匹配。 組織病理采用石蠟切片H

5、E染色觀察；免疫組化采用SP法。免疫組化實驗結果采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件中多個樣本比較的Kruskal-wallisH秩和檢驗，流式細胞術實驗結果SPSS11.5統(tǒng)計軟件中方差分析及線性相關分析。 結果：常規(guī)組織病理檢查：SCC組：表現(xiàn)為不規(guī)則的鱗狀細胞團向下增生，突破基底膜并侵入真皮。腫瘤團塊主要由分化好的鱗狀細胞組成，細胞問橋明顯，團塊內可見多數(shù)角珠。(見圖1) BOD組：表皮角化過度，伴有角化不全，棘層肥厚，表

6、皮突延長增寬，棘細胞排列紊亂，且大部分細胞不典型，細胞大小、形態(tài)不一致，核大而深染，可見角化不良細胞，基底膜完整。(見圖2、圖3) AK組：角化過度伴角化不全，表皮下層可見不典型角質形成細胞，核大，染色質豐富，細胞排列有些紊亂，這些不典型角質形成細胞呈芽蕾狀向下增生，真皮淺層膠原示日光彈力變性。(見圖4) 免疫組化結果：從正常皮膚→到光線性角化病(癌前病變)→BOWEN病(原位癌)→皮膚鱗狀細胞癌，F(xiàn)HIT的陽性表達位于

7、表皮層，特異性著色位于胞漿或(和)胞核內，陽性率依次降低；正常皮膚均見FHIT陽性表達，且呈彌漫性分布，而AK、BOD、SCC則呈點片狀或區(qū)域性陽性表達甚至無表達。正常皮膚組明顯高于AK組、BOD組、SCC組，差異有顯著性(p＜0.05)；AK組高于BOD組、SCC組，差異有顯著性(p＜0.05)；BOD組與SCC組比較差異無顯著性(p＞0.05) 流式細胞分析結果：(1)熒光指數(shù)(FI)結果：從正常皮膚→AK組→BOD組→SC

8、C組，F(xiàn)HIT蛋白含量依次降低，各組之間的比較差異性同免疫組化的結果。 (2)細胞增殖指數(shù)(PI)結果：AK組、BOD組、SCC組均高于正常皮膚組，(P＜0.05)；SCC組、BOD組與AK組比較，差異有顯著性(P＜0.05)。SCC組與BOD組比較，組問無差異，(P＞0.05)。 (3)熒光指數(shù)(FI)與細胞增殖指數(shù)(PI)呈明顯的負相關，(r=-0.806,p＜0.05)。 (4)DNA指數(shù)(DI)及DNA倍

9、體結果：各組的DNA含量比較差異性同細胞增殖指數(shù)。正常皮膚組、AK組均未見非二倍體，而BOD組16例中可見10例出現(xiàn)異倍體，SCC組20例中可見17例出現(xiàn)異倍體。 結論：根據(jù)實驗結果得出以下結論1用免疫組化檢測，F(xiàn)HIT的表達主要分布于表皮層。 病變各組的表達均低于正常皮膚組，而病變各組之間的比較，AK組高于BOD組和SCC組，BOD組和SCC組之間比較無差異。說明FHIT與AK、BOD、SCC的發(fā)生、發(fā)展有相關性。

10、 2用流式細胞術檢測，病變各組的細胞增殖指數(shù)(PI)和DNA含量(DI)均高于正常對照組，各組之間比較除BOD組和SCC組無差異外，其余各組之間的比較均有差異，BOD組和SCC組高于AK組和正常皮膚組，AK組高于正常皮膚組，反映了從正常皮膚到癌前病變(AK)到原位癌(BOD)和侵襲性癌(SCC)，細胞增殖活性逐漸增強；另外，正常皮膚組和AK組未見異倍體出現(xiàn)，而BOD組和SCC組均可見異倍體的出現(xiàn)，說明異倍體的出現(xiàn)也是皮膚癌的一個重要