老年性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞凋亡及其相關(guān)基因蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文老年性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞凋亡及其相關(guān)基因蛋白表達(dá)的研究姓名：李元彬申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：陳薇2001.11.10山東大學(xué)碩士學(xué)位論文________l________●___l●_l__●目的：探討老年性白內(nèi)障與晶體上皮細(xì)胞凋亡的關(guān)系及細(xì)胞凋亡調(diào)控基因P。bcb2蛋白在老年性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞中的表達(dá)。份法：1應(yīng)用透射鏡觀察10例老年性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，并拍照，尋找凋亡小體，并與正常透明

2、晶體上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較。2應(yīng)用Tunel方法檢測老年性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞凋亡的生化特性，凋亡細(xì)胞核呈棕黃色，計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞百分率。3瓊脂糖凝膠電泳：收集20例老年性白內(nèi)障晶體前囊皮，剪碎后離心，以等體積的苯酚／氯仿、苯酚／氯仿／異丙醇和氯仿各抽提1次，用乙醇沉淀DNA，用RNA酶去除RNA。再用瓊脂糖凝膠電泳及溴乙錠染色，紫外燈下拍照。4取30例老年性白內(nèi)障及10例正常透明晶體前囊皮蠟塊，切片，脫蠟，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法，DAB顯色

3、，計(jì)數(shù)其P。bcl2蛋白陽性細(xì)胞百分率。結(jié)果；1透射電鏡下觀察，老年性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞中有凋亡細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)了典型的凋亡小體，正常透明晶體上皮中未見凋亡細(xì)胞。2老年性自內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞中凋亡細(xì)胞率為84～378％，正常透明晶體上皮中未見陽性細(xì)胞。3老年性白內(nèi)障組瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)梯狀圖譜，正常對照組無此梯帶。4B，蛋白在正常透明晶體上皮中無表達(dá)，而在老年白內(nèi)障組中表達(dá)率為169—191％。bel2蛋白在兩組中均無表達(dá)。廣—y一一結(jié)論：老年