山橿有效部位的富集純化及質(zhì)量控制研究.pdf

1、　　目的： 建立山橿有效部位的富集純化工藝和質(zhì)量控制方法。
　　方法： 建立運(yùn)用HPLC法測(cè)定球松素含量和紫外分光光度法測(cè)定山橿總黃酮含量的方法,運(yùn)用統(tǒng)計(jì)分析軟件spss17.0對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)；運(yùn)用正交試驗(yàn)方法確立有效部位的最優(yōu)提取工藝；通過考察大孔吸附樹脂類型、上樣條件、洗脫條件等主要指標(biāo),優(yōu)選純化工藝；選取10批純化樣品,建立山橿有效部位HPLC指紋圖譜,運(yùn)用“一測(cè)多評(píng)”法同時(shí)測(cè)定其中4種主要成分的含量,建立有效部位

2、的質(zhì)量控制方法。
　　結(jié)果： (1)球松素 HPLC 含量測(cè)定條件為：檢測(cè)波長(zhǎng) 297nm,甲醇：水梯度洗脫,回歸方程為 Y=2896600X+50479(R=0.9996),線性范圍 0.01μg~2.01μg,平均加樣回收率為100.01%,RSD=1.35%(n=6)。(2)總黃酮含量的方法：以球松素為對(duì)照品,測(cè)定波長(zhǎng)為286nm,回歸方程為Y=0.081x+0.008(R=0.9994),在2.22μg/mL~17.80

3、μg/mL 范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,平均加樣回收率為 0.9973,RSD=2.64%(n=6)。(3)最優(yōu)的提取工藝條件： 12倍量70%乙醇,浸泡30分鐘,超聲提取1小時(shí),重復(fù)提取3次。結(jié)果分別按各指標(biāo)與原藥材比率計(jì),總黃酮提取率4.23%,球松素提取率0.59%。純化工藝條件為：DM130型樹脂,按徑高比1：8裝柱, 上樣濃度0.05(g/ml) [以生藥材計(jì)],上樣4BV(倍樹脂量),流速3BV/h,上樣完成后靜置2h,以4BV的

4、純水進(jìn)行除雜后,4BV的70%乙醇以3BV/h的速率進(jìn)行洗脫,樹脂上樣3次后需再生。按照確定的工藝條件進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果使最終的純化物中總黃酮含量達(dá)到 50.0%以上,球松素含量達(dá)到9.0%以上。(4)建立的HPLC指紋圖譜標(biāo)示了12個(gè)共有峰,10批樣品相識(shí)度在0.96以上,通過已知化合物進(jìn)行指認(rèn),確定了其中7個(gè)成分。在指紋圖譜建立的色譜條件下,同時(shí)建立了一測(cè)多評(píng)法,可以在僅有球松素對(duì)照品的情況下,運(yùn)用校正因子同時(shí)測(cè)定四個(gè)主要有效成分的含量