金線蓮降血脂有效部位工藝及質(zhì)量控制研究.pdf

1、金線蓮（Anoectochilus roxburghi），即花葉開唇蘭，屬于蘭科開唇蘭屬，是一種多年生的草本植物。金線蓮是我國傳統(tǒng)的草本藥材，具有清熱解毒，滋陰祛火，消炎鎮(zhèn)痛的功效，對不知原由的腫痛、發(fā)燒、止瀉、蛇傷等均有顯著療效，且毒副作用小，使用安全。在現(xiàn)代中藥研究中，金線蓮多用于糖尿病、高血脂癥、乙型肝炎等疾病的治療。隨著金線蓮研究的深入，金線蓮的優(yōu)良治療效果日益得到關(guān)注，受到廣大民眾的青睞，具有廣闊的開發(fā)前景?；诓菟幗鹁€蓮在民

2、間分布范圍和應(yīng)用較廣、療效確切這一實(shí)際情況，本研究擬對金線蓮中具有降血脂的物質(zhì)基礎(chǔ)部分進(jìn)行系統(tǒng)的研究；提取純化有效部位，進(jìn)行工藝及質(zhì)量控制研究。
　　制備工藝研究
　　課題根據(jù)查閱相關(guān)文獻(xiàn)的資料，確定本品發(fā)揮療效的主要活性成分為以金線蓮苷為主的苷類成分，并運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件對各試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，從而優(yōu)選出相關(guān)的試驗(yàn)參數(shù)。
　　提取工藝研究
　　因?yàn)榻鹁€蓮苷極性較大，易溶于水和乙醇，所以決定對提取溶劑進(jìn)行考察。其次，因?yàn)?/p>

3、金線蓮苷在溶劑中熱不穩(wěn)定，易分解的性質(zhì)，決定對提取的溫度進(jìn)行考察。
　　最佳提取工藝考察：采用L9（34）正交試驗(yàn)，以金線蓮苷提取率為考察指標(biāo)，考察提取溫度、提取時(shí)間、加水倍數(shù)和提取次數(shù)，優(yōu)化水提工藝條件。結(jié)果表明水提最優(yōu)條件為：加15倍量水，80℃提取3次，每次2小時(shí)。
　　純化工藝研究
　　醇沉工藝考察：因?yàn)榻鹁€蓮水提取物中含有相當(dāng)多的糖類成分，所以需要經(jīng)過醇沉工藝進(jìn)行沉降，去除糖類雜質(zhì)。以醇沉雜質(zhì)質(zhì)量為考察指標(biāo)，

4、考察乙醇濃度，優(yōu)化醇沉工藝條件。結(jié)果顯示醇沉最佳條件為：浸膏濃縮至相對密度為1.13（45℃測），加入乙醇使含醇量為80％，混勻后靜置12小時(shí)。
　　過柱精制工藝考察：為去除極性較小的雜質(zhì)和極性較大的糖類雜質(zhì)，選用兩種類型樹脂包括DM131大孔吸附樹脂、UBK555離子交換樹脂進(jìn)行考察，以干膏中金線蓮苷含量為考察指標(biāo)。結(jié)果表明，選用UBK555離子交換樹脂能夠很好地去除糖類雜質(zhì)，精制效果較好。
　　質(zhì)量控制研究
　　采

5、用HPLC-ELSD法對金線蓮有效部位中金線蓮苷進(jìn)行定量分析。色譜柱為Hypersil NH2（5μm，4.6×250mm）；流動(dòng)相為乙腈：水（92:8）；流速為1.0ml/min；柱溫為30℃；蒸發(fā)光散射檢測器霧化室溫度為40℃；氮?dú)鈮毫?50kPa；信號值為7。結(jié)果：金線蓮苷進(jìn)樣量在0.524-5.24μg范圍內(nèi)，峰面積（A）的對數(shù)值InA與相應(yīng)質(zhì)量（M）的對數(shù)值InM線性關(guān)系良好（r=0.99993），平均加樣回收率為98.22