兒童急性淋巴細(xì)胞白血病TEL-AML1融合基因篩查及多藥耐藥基因和糖皮質(zhì)激素受體基因表達(dá)的研究.pdf

1、目的 探討TEL-AMLI融合基因在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)中的發(fā)生率以及兒童TEI-AMLl融合基因陽(yáng)性ALL的臨床特點(diǎn)。 方法 收集2004年10月至2006年1月在我院經(jīng)骨髓檢查確診的ALL患兒的病歷資料和骨髓或外周血標(biāo)本56份，采用筑巢式RT-PCR方法對(duì)其進(jìn)行TEL-AMLl融合基因篩查，并對(duì)擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物經(jīng)DNA測(cè)序證實(shí)與TEL-AMLl融合基因序列相同，同時(shí)分析TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性

2、ALL患兒臨床、免疫分型、細(xì)胞遺傳學(xué)、治療反應(yīng)特點(diǎn)，并與TEL-AMLl融合基因陰性ALL患兒進(jìn)行比較。 結(jié)果 1．56例兒童ALL患兒中，TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性者14例，陽(yáng)性率達(dá)25.0％，PCR產(chǎn)物測(cè)序除48位點(diǎn)有一個(gè)堿基缺失和240位點(diǎn)的堿基C被A所取代外，所測(cè)得的PCR產(chǎn)物序列與TEL-AMLl融合基因及融合位點(diǎn)序列一致。 2．本組資料顯示TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性組ALL患兒年齡分布于1.2～

3、14.7歲，年齡的中位數(shù)為6.7歲，男女比例1.3：1；初診時(shí)肝脾腫大程度、外周血白細(xì)胞總數(shù)(中位數(shù))6.35×lO<'9>/L及幼稚細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)2.45×10<'9>／L、貧血程度(61.9±15.2 g／L)、血清乳酸脫氫酶水平 (581.46±303.05U／L)均顯著低于TEL-AMLl融合基因陰性組ALL患兒 (P值分別為0.044，0.005，0.035，0.037，0.035和0.005)，而血小板計(jì)數(shù)(中位數(shù)為45×

4、lO<'9>／L)及初診時(shí)骨髓幼稚淋巴細(xì)胞百分率 (87.58±16.41％)與TEL-AMLl融合基因陰性組值相比無(wú)顯著性差異(P值分別為0.245和0.343)；TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性組ALL患兒免疫表型多為前體B細(xì)胞型ALL，兩組患兒CDl3和CD34的表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)顯著性差異，TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性組ALL患兒不伴有CD20和CD33的表達(dá)；TEL—AMLl融合基因陽(yáng)性組患兒強(qiáng)的松敏感試驗(yàn)均敏感，但兩組患兒第15天骨

5、髓緩解率無(wú)顯著性差異。 結(jié)論 1．TEL-AMLl融合基因在本組兒童ALL患兒中的發(fā)生率為25.0％。 2．伴有TEL-AMLl融合基因表達(dá)的ALL患兒初診時(shí)肝脾腫大程度、外周血白細(xì)胞總數(shù)和幼稚細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)、LDH水平均顯著低于TEL-AMLl融合基因陰性組患兒，提示陽(yáng)性組患兒體內(nèi)腫瘤負(fù)荷顯著低于陰性組患兒；潑尼松敏感試驗(yàn)陽(yáng)性組參與治療的8例全部均敏感；這些臨床特征是小兒TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性ALL治療效果

6、好、預(yù)后佳的重要因素。 目的 研究多藥耐藥基因(MDR-1)在兒童TEL-AML1融合基因陽(yáng)性ALL中的表達(dá)水平并與TEL-AML1融合基因陰性ALL患兒MDR-1表達(dá)水平比較，以期探討兒童TEL-AML1融合基因陽(yáng)性ALL治療反應(yīng)好的分子機(jī)理。 方法 以K562細(xì)胞株作為陽(yáng)性對(duì)照，采用半定量RT-PCR方法研究50例兒童ALL中TEL-AML1融合基因陽(yáng)性患兒MDR-1基因mRNA表達(dá)情況并與陰性組值進(jìn)

7、行比較。 結(jié) 果 50例兒童ALL患兒中，TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性組患兒(n=13)白血病細(xì)胞MDR-1／GAPDH光密度掃描比值中位數(shù)為0.19(0.005～0.502)，而陰性組ALL(n=37)患兒白血病細(xì)胞MDR-1／GAPDH光密度比值中位數(shù)為0.44(0.045～1.308)，兩組MDR-l／GAPDH光密度比值經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析存在顯著性差異，TEL-AML1融合基因陽(yáng)性組患兒的MDR-1mRNA的表達(dá)顯著低

8、于陰性組。 結(jié) 論 TEL-AML1融合基因陽(yáng)性ALL患兒白血病細(xì)胞MDRl mRNA表達(dá)水平顯著低于TEL-AMLl融合基因陰性ALL患者，可能是TEL-AML1融合基因陽(yáng)性ALL患者對(duì)化療藥物敏感、治療反應(yīng)及預(yù)后好的重要原因之一。 目的 研究糖皮質(zhì)激素受體(GR)各亞型mRNA在兒童TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性ALL中的表達(dá)情況，以期探討兒童TEL-AMLI融合基因陽(yáng)性ALL對(duì)潑尼松敏感分子機(jī)理。

9、 方法 采用半定量RT-PCR方法研究50例兒童ALL患兒中TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性組和陰性組GR各亞型(GR α、GR β、GRγ 和GRP)mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果 對(duì)TEL-AMLl融合基因陽(yáng)性組和陰性組ALL患兒白血病細(xì)胞GR各亞型PCR產(chǎn)物電泳條帶進(jìn)行光密度掃描測(cè)定，其中陽(yáng)性組GR α／GAPDH比值的中位數(shù)為0.592(0.029～2.487)，陰性組為0.773(0.011～11.

10、323)；陽(yáng)性組GR β／GAPDH中位數(shù)為0.099(0.003～0.384)，陰性組為0.357(0.002～4.568)；陽(yáng)性組GR β／GR α的中位數(shù)為0.187(0.008～0.756)，陰性組為0.500(0.004～14.111)；陽(yáng)性組GR γ／GAPDH比值的中位數(shù)為0.314(0.008～0.579)，陰性組為0.327(0.016～7.286)；陽(yáng)性組GRP／GAPDH的中位數(shù)為10.33(0.045～2.139