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文檔簡介
1、目的:通過檢測高血壓病患者及自發(fā)性高血壓大鼠β<,1>腎上腺素受體(β<,1>-AR)基因甲基化狀態(tài),觀察該基因甲基化修飾對β<,1>受體基因表達的影響,并探討其與美托洛爾降壓療效的關(guān)系。 方法:對人類和大鼠β<,1>受體基因進行生物信息學(xué)分析,了解是否存在甲基化修飾位點。 臨床研究部分,、篩選β<,1>-AR屬于Arg389Arg,Ser49Ser單倍型的高血壓病患者80例,給予相同劑量美托洛爾降壓治療(50mg,每日
2、兩次);觀察八周后根據(jù)血壓下降水平將患者分為顯效組、有效組和無效組。采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)方法檢測所有患者外周血β<,1>受體基因甲基化狀態(tài),比較各組間β<,1>受體基因甲基化修飾的差異,探討β<,1>受體基因甲基化修飾與美托洛爾降壓療效的關(guān)系。 實驗研究部分,給予32只自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)相同劑量的美托洛爾(25mg/kg/d)進行降壓治療。四周后,提取動物心肌組織及眼球血DNA,用MSP方法檢測β<,1
3、>受體基因甲基化狀態(tài);提取心肌組織RNA,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測β<,1>受體基因mRNA的表達;同時進行組織切片,用免疫組化方法檢測β<,1>受體蛋白的表達。 結(jié)果:生物信息學(xué)分析顯示人類和大鼠β<,1>受體基因均存在甲基化修飾位點。 臨床研究部分,美托洛爾治療高血壓患者顯效組(n=28)舒張壓平均下降(15.9±6.0)mmHg、有效組(n=22)下降(6.6±1.9)mrnt{g、無效組(n=3
4、0)下降(.3.7±0.8)mmHg,總有效率(顯效+有效)為62.50[%]。三組患者外周血β<,1>-AR.基因甲基化水平檢測結(jié)果顯示,成人外周血β<,1>-AR基因均存在甲基化修飾,個體間無差異。 實驗研究部分,SHR心肌組織β<,1>-AR基因被甲基化修飾后,β<,1>-AR基因mRNA表達下調(diào)(0.67±0.09 vs.0.42±1:0.04,,P<0.05)但夕1-AR蛋白表達量無明顯改變(0.29±0.01 vs.
5、0.28±0.01,P>0.05);同時,存在心肌組織β<,1>-AR基因甲基化修飾的個體對美托洛爾降壓的反應(yīng)下降(P<0.05)。SHR外周血β<,1>AR基因均存在甲基化修飾,個體間無差異。 結(jié)論:1、SHR心肌組織β<,1>-AR基因存在甲基化與非甲基化修飾的差異,甲基化修飾后的β<,1>-AR基因mRNA表達下調(diào),但β<,1>-AR蛋白表達量無明顯改變。 2、高血壓患者及SHR外周血β<,1>-AR基因均被甲基化
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