實(shí)驗(yàn)性近視眼細(xì)胞凋亡及相關(guān)凋亡基因BCL-2和細(xì)胞因子BFGF的研究.pdf

1、　　目的：研究發(fā)育期豚鼠在配戴不同度數(shù)的凹透鏡后眼球屈光狀態(tài)和眼軸的變化，探討細(xì)胞凋亡在透鏡誘導(dǎo)豚鼠近視眼后極部鞏膜組織中的表達(dá)及其在近視形成中的作用；檢測(cè)透鏡誘導(dǎo)豚鼠近視眼后極部鞏膜組織中B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2基因(bcl-2)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)表達(dá)量的變化，探索兩種因子在近視形成中的作用。通過體外培養(yǎng)豚鼠鞏膜細(xì)胞，利用紫外線誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡模型，明確凋亡抑制基因bcl-2和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)鞏膜細(xì)胞

2、凋亡的影響；
　　方法：第一部分：選健康豚鼠45只，隨機(jī)分成Ⅰ組(右眼配戴-20D)、Ⅱ(右眼配戴-10D)Ⅲ組(不作任何干預(yù))。實(shí)驗(yàn)前、后用檢影驗(yàn)光法測(cè)量3組的屈光度，用A超測(cè)量眼軸長(zhǎng)度。誘導(dǎo)2周后，過量麻醉法處死動(dòng)物，摘掉眼球，取后極部鞏膜組織。用終末脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)原位缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)近視眼模型和對(duì)照組鞏膜細(xì)胞中細(xì)胞增生指數(shù)(PI)、細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)。探討細(xì)胞凋亡和增生在實(shí)驗(yàn)性近視

3、眼發(fā)生機(jī)制中的作用。為了增加細(xì)胞凋亡檢測(cè)的準(zhǔn)確度，應(yīng)用透射電鏡檢測(cè)近視眼模型組和對(duì)照組中鞏膜成纖維細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)的變化，明確細(xì)胞凋亡是否存在。采用SAS統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，行t檢驗(yàn)和配對(duì)t檢驗(yàn)對(duì)透鏡誘導(dǎo)豚鼠近視屈光度和眼軸結(jié)果進(jìn)行分析。對(duì)透鏡誘導(dǎo)近視眼三組的凋亡指數(shù)和增殖指數(shù)，應(yīng)用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　第二部分：應(yīng)用免疫組織化學(xué)法對(duì)三組后極部鞏膜組織同時(shí)進(jìn)行凋亡抑制基因bcl-2和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF