牛XY精子分離及體外受精研究.pdf

1、本研究對三頭種公牛的精液進行了分離、冷凍和體外受精試驗。本研究對比了三頭荷斯坦種公牛的精子分離效果，并采用熒光染色法，對常規(guī)凍精和分離凍精的精子活率、頂體完整率和線粒體活性進行檢測，來評價流式細胞儀分離處理對不同種公牛精子生理機能的影響，研究應用不同種公牛常規(guī)凍精和分離凍精的體外受精效果和胚胎發(fā)育能力。試驗結(jié)果表明，不同種公牛個體間除分離準確率外，精子的分離速率和死精率都存在顯著差異(3.7vs4.5vs3.1，9.6 vs 7.7 v

2、s 14.7，P<0.05)。分離和冷凍處理不同程度地降低了每頭種公牛精子的存活能力、活率、頂體完整率和線粒體活性，無明顯差異(P>0.05)。此外，1號與3號種公牛的精子活率和頂體完整率在分離冷凍后則差異顯著(精子活率：1號種公牛28.2 vs 3號種公牛46.3，頂體完整率：1號種公牛32.2 vs3號種公牛53.3，P<0.05)，而2號種公牛和3號種公牛間沒有顯著差異(P>0.05)。上述結(jié)果表明，流式細胞儀分離和冷凍處理對牛精

3、子存活能力、活率、頂體完整率和線粒體活性與常規(guī)凍精相比造成明顯傷害，但分離后的精子可用于受精使用。不同種公牛個體間精子的分離速率、死精率、以及對分離和冷凍處理的耐受性存在顯著差異。利用不同種公牛的常規(guī)凍精和分離凍精進行體外受精試驗，試驗結(jié)果表明利用不同種公牛分離凍精進行受精，受精后的原核形成率、卵裂率(35.7vs67.2vs58.1，31.9vs 60.6vs53.1，P<0.05)存在顯著差異，但是囊胚細胞數(shù)則沒有差別(P>0.05

4、)。1號種公牛分離凍精組的囊胚發(fā)育率顯著低于2種公牛(15.4vs24.0，P<0.05)，與3號種公牛差異不顯著(P>0.05)。試驗結(jié)果說明不同種公牛分離凍精能夠使成熟牛卵母細胞受精并支持其發(fā)育到囊胚階段，但是由于在分離、冷凍、解凍過程中不同種公牛精子對其耐受能力的不同，造成其解凍后存活能力和生理功能指標不同程度的下降，從而影響其受精效率，并在種公牛個體間表現(xiàn)出顯著差異。選擇適宜的種公牛，對于提高精子的分離效率和分離精液的品質(zhì)都有著