促排卵周期未成熟卵母細胞體外成熟的發(fā)育潛能研究及其線粒體膜電位檢測.pdf

1、本文主要從以下幾個方面進行了論述：
　　第一部分：促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母細胞體外培養(yǎng)中的應用
　　目的：通過對不孕癥患者促排卵治療周期獲得的未成熟卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)研究，評價FSH/HCG在促排卵周期未成熟卵母細胞體外培養(yǎng)過程中的應用價值。
　　方法：收集控制性超促排卵周期行ICSI過程中得到的MⅠ期和GⅤ期卵母細胞，分別隨機分為加FSH/HCG培養(yǎng)組和不加FSH/HCG培養(yǎng)組，培養(yǎng)24小時-28小時后成

2、熟卵母細胞進行ICSI授精，并觀察胚胎發(fā)育情況，記錄成熟率、受精率，卵裂率和優(yōu)胚率。
　　結(jié)果：對于MⅠ期卵母細胞，是否使用FSH/HCG不影響其24小時成熟率、受精率、分裂率和優(yōu)胚率(p＞0.05)。對于GⅤ期卵母細胞，培養(yǎng)液中加入FSH/HCG顯著提高優(yōu)質(zhì)胚胎率(31.3％VS4.2％，p＜0.05)，但兩組的成熟率，受精率和卵裂率沒有顯著差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：控制性超促排卵中獲得的未成熟卵母細胞進一步體外培

3、養(yǎng)可以自然成熟，在GⅤ期卵母細胞培養(yǎng)過程中加入FSH/HCG能夠改善體外培養(yǎng)結(jié)果。
　　第二部分：線粒體膜電位檢測在評價體外成熟卵母細胞發(fā)育潛能中的應用
　　目的：通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察不同獲取時期、不同培養(yǎng)時間的體外成熟卵母細胞的線粒體膜電位情況，評估線粒體膜電位檢測對體外成熟卵母細胞發(fā)育潛能的應用價值。
　　方法：收集常規(guī)促排卵周期行ICSI過程剩余的未成熟卵母細胞(MⅠ和GⅤ)，隨機分為兩組，分別于24小時

4、后和48小時后通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察成熟后經(jīng)JC-1(5,5'，6,6'-tetrachloro-1,1'，3,3'-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)染色的MⅡ期卵母細胞的線粒體膜電位，其紅色熒光主要呈三種狀態(tài)分布即卵母細胞近皮質(zhì)的周邊分布、胞質(zhì)內(nèi)的點狀分布、極少觀測到。
　　結(jié)果：24小時成熟卵母細胞與48小時成熟卵母細胞，雖然隨著時間的延長，周邊分布的比利大大降低，但與

5、其他分布結(jié)果相比沒有顯著性差異(P)0.05)。對于GⅤ期卵母細胞，D1天與D2天成熟的卵母細胞的線粒體膜電位的熒光分布沒有顯著性差異(P＞0.05)。對于MⅠ期卵母細胞，D2天相對于D1天成熟的卵母細胞，線粒體膜電位周邊分布更少，但與D1天成熟卵母細胞相比沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：線粒體膜電位的檢測僅可以部分的反應體外成熟的卵母細胞的活性和發(fā)育潛能，察到，延遲成熟的卵母細胞較早成熟的卵母細胞的線粒體膜電位更低，