兩株植物內(nèi)生真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、植物內(nèi)生真菌（Endophytic fungi）是指在植物寄主中度過(guò)全部或者近乎全部生活周期而不使寄主表現(xiàn)任何癥狀的一類真菌。它是生活在植物組織內(nèi)的一類微生物，是植物生態(tài)系統(tǒng)中的天然組成成分。植物內(nèi)生真菌可以產(chǎn)生與宿主植物相同或相近的具活性的代謝產(chǎn)物，因而成為天然藥物研究與開(kāi)發(fā)的重要來(lái)源。1993年，美國(guó)科學(xué)家Stierle等首次從短葉紅豆杉(Taxus breviflia)中分離得到一株能夠代謝出紫杉醇的植物內(nèi)生真菌—Taxomyce

2、s andreanae，這一發(fā)現(xiàn)掀起了一場(chǎng)從植物中分離內(nèi)生真菌并對(duì)其藥理活性和機(jī)理研究的熱潮。在后來(lái)的研究當(dāng)中，發(fā)現(xiàn)植物內(nèi)生真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物具有抗腫瘤、抗菌、抗氧化、降血糖、免疫抑制、抗病毒等等活性。因此，對(duì)內(nèi)生真菌藥用活性代謝產(chǎn)物在作為野生藥用植物替代資源以及新型藥物研制方面發(fā)揮了巨大作用。本論文所研究的對(duì)象菌株Guignardia mangiferae來(lái)源于羅浮山土茯苓；而菌株Endomelanconiopsis則來(lái)源于羅浮山五指毛

3、桃，兩株菌株均來(lái)源于廣東特色藥材。對(duì)研究以及開(kāi)發(fā)我國(guó)南方藥用植物內(nèi)生真菌具有深遠(yuǎn)意義。對(duì)上述兩株植物內(nèi)生真菌進(jìn)行大規(guī)模發(fā)酵和次級(jí)代謝產(chǎn)物研究，并對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)試評(píng)價(jià)。
　　采用常規(guī)的硅膠柱層析、凝膠Sephadex LH-20柱層析、反相硅膠柱層析、制備薄層以及重結(jié)晶等各種分離手段分離得到單體化合物。利用各種現(xiàn)代波譜技術(shù)一維二維核磁(IR、UV、EI-MS、HR-ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、DE

4、PT、HSQC、1H-1H COSY、HMBC等)并結(jié)合單晶衍射等各種方法從兩株菌株發(fā)酵提取物中鑒定了43個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)(新化合物14個(gè))。其中，從菌株Guignardia mangiferae代謝產(chǎn)物中分離并鑒定了30個(gè)化合物，其中10個(gè)化合物為雜合萜類新化合物（Guignardones D~M），2個(gè)新天然產(chǎn)物；從Endomelanconiopsis發(fā)酵液提取物中分離鑒定了13個(gè)化合物，其中4個(gè)新化合物（Endomelanconio

5、psis A-D）。
　　對(duì)以上分離得到的化合物進(jìn)行抗腫瘤體外細(xì)胞毒活性初步評(píng)價(jià)。各種化合物呈現(xiàn)不同的抑制程度。具體如下：從菌株Guignardia mangiferae中，化合物GY16、GY17、GY18抗腫瘤活性較好，但它們是塑化劑類化合物，不僅對(duì)癌細(xì)胞具有殺傷，對(duì)正常細(xì)胞也具有殺傷，因此不具備開(kāi)發(fā)價(jià)值。10個(gè)新化合物對(duì)SF-268細(xì)胞均具有選擇性的抑制作用，其中化合物GY4*對(duì)MCF-7表現(xiàn)良好的抑制活性。從Endomel