坡壘酚甲在AD小鼠模型中對(duì)Aβ誘導(dǎo)的線粒體功能障礙的抑制作用及機(jī)制探討.pdf

1、背景與目的：淀粉樣β蛋白(Aβ)與淀粉樣β蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶(ABAD)結(jié)合誘導(dǎo)線粒體功能障礙產(chǎn)生氧化應(yīng)激是阿爾茨海默病(AD)發(fā)病的主要機(jī)制之一。坡壘酚甲(Hopeahainol A)是從我國(guó)海南特有植物坡壘樹(拉丁學(xué)名：Hopea hainanensis)中分離純化的一種天然多酚類化合物。前期試驗(yàn)表明坡壘酚甲在AD模型中具有強(qiáng)抗氧化作用和腦保護(hù)作用。因此，我們擬在探索坡壘酚甲是否通過抑制Ap與ABAD結(jié)合從而抑制Aβ誘導(dǎo)的線粒體功能

2、障礙，減少氧化應(yīng)激，最終治療AD。
　　 方法：本研究分為體內(nèi)研究和體外研究?jī)刹糠帧ｓw內(nèi)研究采用雙轉(zhuǎn)基因APP/PS1小鼠(8個(gè)月)，體外研究對(duì)象為Aβ1-42處理原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)元(24小時(shí))，然后采用坡壘酚甲干預(yù)。1)在體內(nèi)外用分光光度計(jì)法檢測(cè)坡壘酚甲處理前后線粒體復(fù)合物IV、ABAD和Caspase3活性，并采用Western blot檢測(cè)細(xì)胞色素C的釋放情況。2)采用免疫共沉淀法和免疫熒光顯微鏡檢測(cè)坡壘酚甲處理前后Aβ1

3、-42處理原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)元中Aβ1-42與ABAD結(jié)合和共表達(dá)分布情況變化。3)采用高效液相法測(cè)量坡壘酚甲在加入Aβ1-42前后含量變化從而檢測(cè)坡壘酚甲與Aβ1-42的結(jié)合情況并采用計(jì)算機(jī)模擬計(jì)算二者結(jié)合位點(diǎn)。
　　 結(jié)果：1)坡壘酚甲能有效抑制Aβ誘導(dǎo)的線粒體功能障礙。2)坡壘酚甲能抑制Aβ與ABAD結(jié)合。3)坡壘酚甲通過與AβC端丙氨酸(Ala42)形成氫鍵從而競(jìng)爭(zhēng)性抑制Aβ與ABAD結(jié)合。
　　 結(jié)論：坡壘酚甲可