乳桿菌對高脂膳食誘導小鼠肥胖形成抑制作用及機制研究.pdf

1、肥胖與高血脂、糖尿病等代謝綜合征密切相關，已經成為全球公共健康問題。肥胖的發(fā)生與很多因素相關，其中長期的高脂膳食是引起肥胖的一個重要因素。由于藥物及手術等控制體重會引起一些副作用，因此，在食品科學領域，尋求治療高脂膳食引起的肥胖受到廣泛關注。益生菌作為一種對人體健康有益的活的微生物，現如今被用于治療肥胖的一種手段。然而益生菌治療肥胖的機制尚不明確，需要進一步研究。
　　本課題擬從三株乳酸菌中篩選出對高脂膳食誘導Balb/c小鼠肥胖

2、有明顯抑制作用的益生菌株，研究其對肥胖小鼠肝臟的影響；探究肥胖小鼠腸道菌群變化及脂肪因子的改變，進而推斷乳桿菌抑制小鼠肥胖形成的機制。開發(fā)出具有減少機體脂肪沉積的專用益生菌產品，為肥胖的預防和控制提供新的思路。
　　給高脂膳食Balb/c小鼠以108及109CFU/mL劑量灌胃由本實驗室分離鑒定得到的Lactobacillus paracaseisubsp.ParacaseiM5(M5),Lactobacillus paracas

3、ei subsp.ParacaseIX12(X12),Lactobacillus coryniformissubsp.torquensT3(T3)三株乳桿菌，6周末，M5及T3顯著降低小鼠體重，體脂率及Lee’s指數（P<0.05），并且呈現出劑量依賴性。通過測定小鼠血清甘油三酯（TG），總膽固醇（TC），高密度脂蛋白（HDL），低密度脂蛋白含量（LDL），結果顯示，M5及T3高劑量組顯著降低血清TG、TC、LDL含量，顯著升高HDL含

4、量（P<0.05）。同時三株乳桿菌以相同劑量灌胃對照膳食組小鼠，并未對小鼠產生不良影響。綜上結果提示，M5及T3菌株能抑制高脂膳食引起的小鼠肥胖及血脂升高。
　　三株乳桿菌通過抑制肝臟脂質累積及氧化應激，從而抑制了非酒精性脂肪肝的發(fā)生：通過肝臟HE染色切片可見，乳桿菌灌胃高脂膳食小鼠后，T3及M5兩株菌明顯改善小鼠肝臟脂肪病變；通過對肝臟甘油三脂含量的測定可知，乳桿菌的灌胃降低了高脂膳食小鼠的肝臟TG含量，抑制了肝臟脂質的累積，從

5、而抑制了脂肪肝的發(fā)生，其中T3及M5兩株菌效果顯著（P<0.05）；長期高脂膳食使小鼠肝臟受到氧化損傷，乳桿菌灌胃小鼠后，小鼠肝臟抗氧化酶SOD，GSH-Px，CAT水平顯著升高（P<0.05），且呈現出劑量依賴性；同時肝臟MDA水平下降，T-AOC水平升高，抗氧化能力增強，同樣是T3及M5兩株菌效果好于X12；并且小鼠體脂率與SOD、GSH-Px、CAT及T-AOC呈負相關，與MDA呈正相關。實驗結果顯示乳桿菌T3及M5有效抑制了肝臟

6、的損傷，為預防肥胖引起的脂肪肝提供了新思路。
　　乳桿菌通過調節(jié)脂肪因子的表達來控制肥胖發(fā)生：采用ELISA法測定小鼠血清瘦素及脂聯(lián)素的含量，結果顯示M5及T3灌胃6周后，血清瘦素水平降低，及脂聯(lián)素水平顯著升高（P<0.05）；RT-PCR法檢測小鼠脂肪組織中相關脂肪因子的表達，結果顯示高脂膳食使PPAR-γ、TNF-α及FAS表達量顯著升高，經M5及T3灌胃6周后顯著降低了其表達量；X12效果不顯著（P<0.05）。
　　

7、通過高通量測序方法對小鼠腸道菌群多樣性進行分析。高脂膳食誘導的小鼠肥胖使小鼠腸道菌群發(fā)生變化，肥胖使厚壁桿菌與擬桿菌門的比值降低，乳桿菌M5、T3灌胃6周后，小鼠腸道菌群多樣性發(fā)生變化，通過PCoA分析可知，M5、T3干預使高脂膳食小鼠腸道菌群組成趨近于普通膳食小鼠。通過對結腸組織MDA和T-AOC含量的測定，結果顯示M5及T3顯著降低MDA，提高T-AOC含量（P<0.05）。結合高通量測序結果的比較分析可知，灌胃M5、T3后有效控制