抗炎有效成分對基質(zhì)金屬蛋白酶-9的抑制作用及其機理研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）能降解幾乎所有的細胞外基質(zhì)成分.該論文首先建立了靈敏度、特異性強的測定MMP-9活性的明膠酶譜法（Gelatin Zymography）,其原理是：摻入聚丙烯酰胺凝膠中的明膠可被MMP-9降解,考馬斯亮蘭染色后在藍色的背景上出現(xiàn)白色的負染條帶,采用凝膠成像系統(tǒng)掃描并用其軟件分析表明,在一定范圍內(nèi)白色條帶的強度與MMP-9的活性呈正相關(guān).該實驗觀察了18種具有抗

2、炎作用的藥物和化合物,如甾體類的地塞米松、氧化可的松和雌二醇以及非甾體類的環(huán)氧酶抑制劑Rofecoxib、5-脂氧酶抑制劑Zileutone和白三烯生成抑制劑白藜蘆醇等對PMA誘導的U937細胞上清中MMP-9活性的影響.該論文運用小鼠巴豆油耳炎和免疫組化的方法進一步在整體動物模型上觀察了白藜蘆醇、地塞米松和吲哚美辛抗炎作用和MMP-9抑制作用的關(guān)系.該論文運用Western Blot法觀察了這四個化合物對MMP-9蛋白生成的影響.MM

3、P-9作為一種分泌蛋白,在細胞內(nèi)合成后很快被轉(zhuǎn)運到細胞外,在細胞漿中幾乎沒有儲存,該論文用RT-PCR的方法觀察了MMP-9 mRNA水平的變化.該文用電泳遷移率變動分析法（Electrophoretic mobility shift assays,EMSAs）研究了上述化合物對PMA誘導的U937細胞AP-1和NF-κB活化的影響.該論文研究了具有抗炎活性的藥物和化合物對體內(nèi)、外MMP-9的影響,并從蛋白、mRNA及核轉(zhuǎn)錄因子水平對其

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