SE后GDNF、GDNFRα和Ret在大鼠頂葉皮質(zhì)和海馬的表達(dá).pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文SE后GDNF、GDNFRα和Ret在大鼠頂葉皮質(zhì)和海馬的表達(dá)姓名：王軍申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：高旭光2000.4.1時(shí) 組、 S E 后8 小時(shí) 組、 S E 后 1 天組、 S E 后3 天組、 S E 后5 天 組、 S E后 7 天組。動物模型 采用鏗一 匹羅卡品 大鼠S E 模型。 腹腔注射抓化 鏗3 m E q / k g ， 在注射后 1 6 一 1 8 小時(shí)予以匹羅卡品4 0

2、m g / k g 腹腔注射， 并同 時(shí)予以 澳甲 基阿 托品1 0 m g / k g 腹腔注射以 減少匹羅卡品的中 樞外的 副作用。 在給予匹 羅卡品 后 巧- 3 0 分鐘， 大鼠出 現(xiàn)痛 性發(fā)作， 最終發(fā)展成 S E 。如在給予匹羅卡品后 1 小時(shí)仍未出現(xiàn) S E ， 可重復(fù)給 予匹 羅卡品。 痛性發(fā) 作的 結(jié)果按 R a c i n e 分級進(jìn)行判定， 出 現(xiàn)連續(xù)的N 級以 上的 痛性發(fā)作為成功。各 組實(shí) 驗(yàn) 動 物 在 各時(shí)

3、間 點(diǎn)， 經(jīng)1 0 %水合氯醛深 麻醉( 8 0 0 m g / k g ) 后， 以 l 0 0 m l 肝素化升生理鹽水和4 9 C 4 %多聚甲 醛2 5 0 m 1 進(jìn)行灌注固定。開顱取全腦置相同固定液中 后固定。自 額極6 m m處切取一塊2 m m厚冠狀腦片放于4 9 C 3 0 %蔗糖溶液中浸泡2 4 小時(shí) 后， 人恒冷切片 機(jī)( 一 2 4 ` C ) 切成6 1 i m厚的切片， 貼附于鉻明 礬 明 膠處 理過的

4、載玻片上， 一 7 0 ℃冰 箱保存。免疫組織化學(xué)染色采用S P 法。統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 處 理: 皮 質(zhì) 區(qū) ‘ 丙 側(cè) 和 歹 卜 側(cè) 幣 央 前 吮 下 區(qū) ) : 在4 0 、 1 0 倍 光 鏡 下 用 物 鏡 測 微 尺 分 別 計(jì) 數(shù)2 0 0 p , m x 2 0 0 } t m 視 野內(nèi) 各 組的G D - N F , G D N F R a 和R e t 陽 性細(xì)胞數(shù)， 每只大鼠 取兩張切片， 每張切片 計(jì)數(shù)3 個(gè)視野

5、。海馬 C A 3區(qū): 在2 0 x 1 0 倍光鏡視野下用物鏡測微尺 計(jì)數(shù) 1 毫米長度的海馬的G D N F , G D N F R a 和R e t 陽 性細(xì)胞 數(shù)， 每只鼠 計(jì)數(shù)2 張 切片。 并計(jì)數(shù)S E 后3 天組海馬C A 3 區(qū) 和門 區(qū)G D N F 陽 性細(xì) 胞和 壞死神經(jīng) 元的 百 分率。 實(shí)驗(yàn)數(shù) 據(jù)以 均數(shù)士 標(biāo) 準(zhǔn)差表 示， 進(jìn)行方 差齊 性檢驗(yàn)， 如 方差齊， 使用t 檢驗(yàn)， 否則用秩和檢 驗(yàn)。 C A 3