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文檔簡介
1、目的:
探討不同時程癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)對大鼠海馬和皮質GABAA受體α1蛋白表達的影響。
方法:
健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠18只,體重250±20 g,隨機分成對照組、SE1 h組和SE2 h組。建立氯化鋰-匹羅卡品SE模型。各組腦組織用振動切片機進行矢狀位切片,片厚300μm。每只老鼠取3張腦片,用sulfo-NHS-SS-b
2、iotin孵育腦片、標記細胞膜蛋白。解剖顯微鏡下分離海馬和皮質組織,分別勻漿,獲得海馬細胞蛋白和皮質細胞蛋白。采用Bradford法測定蛋白濃度。取不同部位細胞勻漿蛋白150μg與neutravidin beads孵育過夜,離心獲得膜蛋白。以GAPDH為細胞內蛋白標志分子,以鈉鉀ATP酶為細胞和細胞膜蛋白內參,進行Western blot半定量檢測,觀察SE對海馬和皮質GABAA受體α1亞基的細胞和細胞膜表達水平的影響。
3、結果:
1.氯化鋰-匹羅卡品SE模型:12只SD大鼠,91.7%誘發(fā)出SE,死亡率為9.3%,總成功率為83.3%。
2.SE對GABAA受體α1亞基細胞表達水平的影響
(1)海馬區(qū):與對照組相比較,SE1 h組和SE2 h組中GABAA受體α1亞基的細胞表達量無明顯變化(P>0.05)。
(2)皮質區(qū):與對照組相比較,SE1 h組和SE2 h組中GABAA受體α1亞基的細胞表達量
4、無明顯變化(P>0.05)。
3.SE對GABAA受體α1細胞膜表達水平的影響
(1)海馬區(qū):與對照組相比,SE1 h組、SE2 h組GABAA受體α1亞基的細胞膜表達水平均明顯下降(P<0.01),且SE2 h組較SE1 h組下降更明顯(P<0.01);
(2)皮質區(qū):與對照組比,SE1 h組GABAA受體α1亞基的細胞膜表達無明顯變化(P>0.05),但SE2 h組中GABAA受體α1亞基的
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