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1、釀酒酵母ScRck2是一個(gè)Ser/Thr類(lèi)蛋白激酶,作用于HOG途徑的下游,被Hogl-MAP Kinase磷酸化而激活。在Rck2蛋白C末端存在著一個(gè)Hogl結(jié)合位點(diǎn)(TILQR589R590KKVQ),R589A/R590A雙點(diǎn)突變無(wú)法介導(dǎo)MAPKK Pbs2pDD所引起的致死作用。Rck2p C末端123個(gè)氨基酸殘基包含激酶活性自主抑制序列,故缺失該123個(gè)氨基酸殘基可以介導(dǎo)Pbs2pDD所引起的致死作用,同時(shí)缺失該段氨基酸殘基會(huì)
2、抑制Rck2p在過(guò)量表達(dá)情況下的降解。為了進(jìn)一步確定激酶活性自主抑制序列的功能區(qū)域,我們構(gòu)建了C末端分別缺失27、60和90個(gè)氨基酸殘基的突變體ScRck2pΔ27aa,ScRck2pΔ60aa和ScRck2pΔ90aa。將這些突變體分別與PGAL-Pbs2DD共轉(zhuǎn)化到rck2缺失菌株中,發(fā)現(xiàn)ScRck2△27aa無(wú)法介導(dǎo)MAPKKPbs2pDD所引起的細(xì)胞致死作用,說(shuō)明C末端27個(gè)氨基酸殘基并未包含激酶活性自主抑制序列。突變體蛋白過(guò)量
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