灰樹(shù)花多糖及其硫酸化衍生物的結(jié)構(gòu)鑒定和生物活性研究.pdf

1、灰樹(shù)花（Grifola frondosa）是一種珍貴的食藥兼用菌,多糖成分是其主要的生理活性物質(zhì)。研究表明,灰樹(shù)花多糖具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降血糖等多種功效,而要確定這些藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ),就必須分離出均一的多糖組分。由于多糖類物質(zhì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜,難于純化,因此對(duì)灰樹(shù)花多糖藥理作用的研究大都停留在粗多糖水平上,從而制約了對(duì)灰樹(shù)花資源的開(kāi)發(fā)和利用。國(guó)內(nèi)外對(duì)灰樹(shù)花多糖組分的分離純化研究亦有報(bào)道,但充分純化的不多,且大多數(shù)都針對(duì)的是灰樹(shù)花堿提組分。

2、
　　本文對(duì)灰樹(shù)花高濃縮精粉的熱水提取物進(jìn)行分離和純化,并對(duì)所得的多糖均一組分進(jìn)行初步的化學(xué)結(jié)構(gòu)研究。為了進(jìn)一步開(kāi)發(fā)灰樹(shù)花多糖的藥用價(jià)值,本文還對(duì)所得的均一多糖進(jìn)行硫酸化修飾并對(duì)其結(jié)構(gòu)作初步的分析。同時(shí),對(duì)灰樹(shù)花多糖及其硫酸化衍生物進(jìn)行生物活性測(cè)定?；覙?shù)花高濃縮精粉經(jīng)熱水提取獲得水溶性灰樹(shù)花粗多糖GFP。GFP依次經(jīng)DEAE-cellulose陰離子交換樹(shù)脂及Sephadex G-100葡聚糖凝膠分離純化得到GFP1-F、GFP1

3、-M及GFP1-L三種不含蛋白質(zhì)的葡聚糖純品,其分子量依次為1.09×105Da、1.93×104Da和2.76×103Da。甲基化結(jié)果顯示這三種均一多糖所含的糖苷鍵類型相同,為1,4-,1,3-及1,6-糖苷鍵,分支點(diǎn)為1,3,6-連接葡萄糖。
　　采用吡啶-氯磺酸法對(duì)其進(jìn)行硫酸化修飾,硫酸化衍生物GFP1-FS、GFP1-MS及GFP1-LS的紅外光譜分析表明,三個(gè)樣品均在1236.90cm-1和811.81cm-1有硫酸酯鍵

4、的特征吸收峰,13C NMR證明C-6上的羥基被酯化。并且GFP1-FS的硫酸化程度最高,其DS為1.07;GFP1-MS與GFP1-LS的硫酸化程度相當(dāng),DS分別為0.66和0.61。MTT結(jié)果顯示只有GFP1-MS對(duì)A549細(xì)胞的生長(zhǎng)具有較顯著的抑制作用。與阿霉素的協(xié)同實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示GFP1-FS、GFP1-MS及GFP1-LS與0.2μg/mL阿霉素聯(lián)用后,能明顯提高療效,其中200μg/mL GFP1-MS與阿霉素的協(xié)同效果最好,