RAGE和HMGB1在良性前列腺增生和前列腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、前列腺癌是男性泌尿生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率尤其在歐美發(fā)達(dá)國家甚高。2005年美國成年男性新發(fā)惡性腫瘤約70萬，將近三分之一為前列腺癌。2008年，在全球男性新發(fā)惡性腫瘤中，前列腺癌占男性新發(fā)惡性腫瘤的14％，位居第二位，前列腺癌的死亡率占男性惡性腫瘤死亡率6％，位列第六位。目前，我國的前列腺癌發(fā)病率還遠(yuǎn)低于歐美國家，但是隨著我國人均壽命的不斷增長、飲食結(jié)構(gòu)的改變、環(huán)境污染的加劇以及檢測技術(shù)的不斷提高等原因，我國的前列腺癌發(fā)病

2、率呈不斷上升的趨勢。
　　 目前，前列腺癌的發(fā)病機(jī)制尚不明確，由于早期前列腺癌隱匿，癥狀不明顯，所以確診時(shí)已有相當(dāng)一部分患者屬于中晚期前列腺癌，由于未能得到早期診斷而失去了根治性治療的最佳時(shí)機(jī)。目前前列腺癌的篩查主要依靠前列腺特異性抗原(prostatic specific antigen，PSA)，但是由于PSA缺乏特異性，部分前列腺癌患者血清PSA水平很低，存在漏診的可能。從治療的角度上看，根治性治療是前列腺癌最有效的方法，

3、但部分根治性治療的早期前列腺癌患者仍有復(fù)發(fā)的幾率，局部進(jìn)展期前列腺癌和晚期前列腺癌的治療主要依靠內(nèi)分泌治療，但是也幾乎無法避免向激素非依賴性前列腺癌和激素難治性前列腺癌發(fā)展，使治療變得十分困難。由此，當(dāng)前需要迫切尋找新的前列腺癌標(biāo)志物以及潛在的治療新靶點(diǎn)，盡可能做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早干預(yù)、早治療，并且進(jìn)一步提高治療的效果，這成為當(dāng)前前列腺癌研究的重要課題。
　　 目前分子生物學(xué)研究是腫瘤的研究熱點(diǎn)，前列腺癌的發(fā)病機(jī)制和發(fā)生發(fā)展的

4、分子生物學(xué)基礎(chǔ)仍然不清楚。既往大量的研究表明，前列腺癌的發(fā)生發(fā)展與人類8p染色體的畸形，Bcl-2、Fos、c-myc、c-met、ras等原癌基因的激活和表達(dá)上調(diào)，p53、Rb、p16、PTEN、CDKN2等抑癌基因的失活，AR、PSA、VDR等基因多態(tài)性及DNA甲基化等過程有關(guān)。而最近的研究表明，晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（receptor for advanced glycation end products，RAGE）及其配體高遷移

5、率族蛋白B1（high mobility group box1，HMGB1）也與前列腺癌的發(fā)生、進(jìn)展有關(guān)。
　　 RAGE是細(xì)胞表面分子免疫球蛋白超家族中的一員，是一個(gè)具有多配體的跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)受體。RAGE在包括糖尿病慢性并發(fā)癥在內(nèi)的許多疾病中發(fā)揮重要的作用，其能在許多細(xì)胞和組織類型表達(dá)，但是機(jī)體在生理狀態(tài)下除了肺組織高表達(dá)外均呈基礎(chǔ)的低表達(dá)。RAGE在腫瘤的作用是近十多年才發(fā)現(xiàn)的，目前的研究表明，RAGE在除肺癌之外的許多腫瘤

6、表達(dá)上調(diào)，并且與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和不良預(yù)后密切關(guān)聯(lián)。HMGB1屬于DNA結(jié)合蛋白，是一種非組蛋白樣染色體結(jié)構(gòu)蛋白，HMGB1是RAGE在腫瘤作用機(jī)制中最重要的配體，其幾乎在所有的腫瘤組織中表達(dá)升高。研究表明，RAGE和HMGB1的結(jié)合能激活一系列細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。因此，RAGE和HMGB1可能成為腫瘤診斷新的分子標(biāo)志物和腫瘤治療的潛在新靶點(diǎn)。
　　 近年來，大量的研究表明了RAGE和HMGB1

7、的結(jié)合參與了多種腫瘤細(xì)胞的發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移。關(guān)于RAGE、HMGB1蛋白與前列腺癌臨床病理參數(shù)以及預(yù)后的關(guān)系目前在國內(nèi)外尚未見報(bào)道。
　　 目的:
　　 檢測RAGE和HMGB1在良性前列腺增生和前列腺癌組織中的表達(dá)情況以及其差異性;揭示兩者在前列腺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性;研究RAGE和HMGB1的表達(dá)與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系，探討RAGE和HMGB1在前列腺癌發(fā)生、發(fā)展的作用;回顧性分析RAGE和HMGB1與前列腺癌患者的

8、生存情況的關(guān)系，為臨床預(yù)后判斷提供依據(jù)。綜合分析RAGE和HMGB1在前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移的作用，探討兩者作為前列腺癌診斷、治療和預(yù)后判斷的分子標(biāo)志物的可能。
　　 方法:
　　 收集2003年至2009年行手術(shù)或者經(jīng)直腸前列腺穿刺診斷前列腺癌，并且具有完整臨床病理資料的前列腺癌患者組織85例，另外隨機(jī)選擇同期診斷良性前列腺增生患者組織30例作為對照。所有病理均行HE染色確認(rèn)病理診斷后，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢

9、測85例前列腺癌組織和30例良性前列腺增生組織中RAGE和HMGB1的表達(dá)情況。光學(xué)顯微鏡下觀察免疫組化染色情況，進(jìn)行染色結(jié)果分析，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，應(yīng)用x2檢驗(yàn)或Fisher's精確概率法，分析RAGE和HMGB1在良性前列腺增生和前列腺癌組織的表達(dá)差異，并且分析蛋白表達(dá)與前列腺癌患者臨床病理參數(shù)（包括年齡、PSA、Gleason評分、TNM分期等）的關(guān)系;RAGE和HMGB1在前列腺癌組織表達(dá)的相關(guān)性采用S

10、pearman等級相關(guān)分析;采用Kaplan-Meier法，對RAGE、HMGB1蛋白表達(dá)與前列腺癌患者（臨床分期為Ⅲ和Ⅳ期）生存期的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，生存期曲線顯著性的比較用Log-Rank法進(jìn)行分析，用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型作多因素預(yù)后分析。
　　 結(jié)果:
　　 ①RAGE和HMGB1在良性前列腺增生和前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)定位:RAGE主要定位于細(xì)胞漿中，少部分于細(xì)胞膜上;HMGB1主要陽性染色在細(xì)胞核內(nèi)，部分染色

11、在細(xì)胞漿中。
　　 ②RAGE在良性前列腺增生和前列腺癌組織的陽性表達(dá)率分別為46.7％(14/30)和78.8％(67/85)(P=0.001);HMGB1在良性前列腺增生和前列腺癌組織中陽性表達(dá)率分別為33.3％(10/30)和68.2％(58/85)(P=0.001)。RAGE和HMGB1在良性前列腺增生與前列腺癌組織中的表達(dá)率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 ③RAGE和HMGB1兩者的共表達(dá)率在良性前列腺增生與前列腺

12、癌組織中分別為13.3％(4/30)和63.5％(54/85)，RAGE和HMGB1的共表達(dá)率在兩組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。
　　 ④RAGE和HMGB1的蛋白表達(dá)與前列腺癌患者年齡和Gleason評分無關(guān)，HMGB1的蛋白表達(dá)與患者術(shù)前PSA水平無關(guān)，RAGE的蛋白表達(dá)與患者術(shù)前PSA水平相關(guān);RAGE和HMGB1的表達(dá)與前列腺癌患者的T分期、N分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)。
　　 ⑤RAGE和

13、HMGB1的共表達(dá)與前列腺癌患者年齡、Gleason評分和PSA水平無關(guān)，與患者的T分期(P=0.007)、N分期(P=0.002)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(P=0.026)有關(guān)。
　　 ⑥前列腺癌組織中RAGE蛋白的表達(dá)與HMGB1蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.000)，相關(guān)系數(shù)為r=0.511。
　　 ⑦對前列腺癌患者（臨床分期為Ⅲ和Ⅳ期）進(jìn)行隨訪，RAGE、HMGB1的表達(dá)分別與患者生存期在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無相關(guān)關(guān)系，但兩者共表達(dá)的前

14、列腺癌患者預(yù)后比非共表達(dá)患者更差;Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析結(jié)果顯示遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是前列腺癌預(yù)后的不良因素。
　　 結(jié)論:
　　 ①RAGE、HMGB1蛋白的表達(dá)及共表達(dá)在前列腺癌組織中明顯高于良性前列腺增生組織，提示兩者以及其共同作用在前列腺癌的發(fā)生上發(fā)揮作用。
　　 ②RAGE、HMGB1蛋白的表達(dá)及共表達(dá)與前列腺癌患者的臨床分期相關(guān)，PSA水平增高RAGE的表達(dá)增高，提示RAGE和HMGB1可能參與前列腺癌的發(fā)展

15、、浸潤和轉(zhuǎn)移，促進(jìn)了前列腺癌疾病的進(jìn)展。
　　 ③RAGE與HMGB1蛋白在前列腺癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系，提示在前列腺癌組織中RAGE和HMGB1蛋白特異性結(jié)合起協(xié)同、誘導(dǎo)作用，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展，RAGE/HMGB1可能成為前列腺癌治療的新靶點(diǎn)。
　　 ④RAGE、HMGB1共表達(dá)的前列腺癌患者比非共表達(dá)患者預(yù)后更差，提示兩者的共同作用加快了前列腺癌疾病的進(jìn)展，縮短了患者的生存時(shí)間，兩者共表達(dá)可能成為前列癌判斷預(yù)后