免疫相關(guān)性全血細(xì)胞減少患者骨髓補(bǔ)體水平及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量及功能研究.pdf

1、目的：了解免疫相關(guān)性全血細(xì)胞減少（immuno-related pancytopenia，IRP）患者骨髓液補(bǔ)體水平的變化及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cells）數(shù)量和功能狀況，探討補(bǔ)體在IRP患者骨髓造血細(xì)胞破壞機(jī)制中的作用以及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在IRP免疫發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法：研究對(duì)象為124例IRP患者，其中初治患者（初治組）59例、經(jīng)激素免疫抑制及促造血治療后血象恢復(fù)正?；颊撸ɑ謴?fù)組）65例及正常對(duì)照24名。

2、采用ELISA法測(cè)定其骨髓上清中的補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物（C5b-9）、補(bǔ)體總?cè)苎钚裕–H50）、補(bǔ)體C3、C4水平及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-2、TGF-β的水平，并使用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測(cè)IRP患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞膜抗體（CD34+細(xì)胞、Glyco-A+細(xì)胞、CD15+細(xì)胞膜表面自身抗體IgG、IgM）的結(jié)合率及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量（CD4+CD25+/CD4+細(xì)胞）、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞激活狀態(tài)（CD

3、4+CD25+CD127-/CD4+細(xì)胞）；RT-PCR方法檢測(cè)其骨髓單個(gè)核細(xì)胞調(diào)節(jié)性T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子FoxP3和Galectin-10的mRNA表達(dá)。 結(jié)果： 1.IRP初治組患者骨髓C5b-9水平（119.82±53.95）明顯高于恢復(fù)組（100.74±33.42）和正常對(duì)照組（93.86±28.81）（P均<0.05），而恢復(fù)組患者骨髓C5b-9與正常對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；IRP初治組、恢復(fù)組患

4、者骨髓CH50水平（33.29±11.51，30.77±10.34）高于正常對(duì)照組（24.09±6.37）（p<0.05），初治組高于恢復(fù)組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；IRP初治組、恢復(fù)組患者骨髓補(bǔ)體C3水平（4.90±2.19，4.95±3.47）明顯低于正常對(duì)照組（6.98±5.56）（p<0.05），初治組患者骨髓補(bǔ)體C3與恢復(fù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；補(bǔ)體C4水平在IRP各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p值均

5、>0.05）；血清補(bǔ)體水平檢測(cè)結(jié)果與骨髓上清中結(jié)果一致。骨髓C5b-9與CH50水平呈顯著正相關(guān)（r=0.241，p=0.003），骨髓CH50與C3水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.303，p=0.007）。IRP患者初治組與恢復(fù)組骨髓造血細(xì)胞膜抗體IgG型占55.17％，IgM型占54.31％，IgG+IgM型占31.90％，含IgM陽(yáng)性占86.21％。IRP患者IgM陽(yáng)性組與IgM陰性組C5b-9水平比較，IgM陽(yáng)性組高于IgM陰性組（

6、p<0.05）。骨髓補(bǔ)體C5b-9水平與CD34+-IgG陽(yáng)性率、CD34+-IgM陽(yáng)性率均呈顯著正相關(guān)。（r=0.593，p=0.000；r=0.326，p=0.049）。骨髓補(bǔ)體CH50水平與網(wǎng)織紅細(xì)胞比例呈顯著正相關(guān)（r=0.421，p=0.000），與間接膽紅素呈顯著正相關(guān)（r=0.230，p=0.032），與血紅蛋白、白細(xì)胞、血小板、骨髓紅系比例均無(wú)相關(guān)（p均>0.05）。我們觀察了8例IRP患者激素、免疫抑制治療前后各指標(biāo)的

7、變化，網(wǎng)織紅細(xì)胞（reticulocytic Ret）治療后降至正常（p=0.038），WBC治療后升高至正常（p=0.002），骨髓補(bǔ)體C3水平治療后升高（p=0.003），治療后CD34+-IgG、CD34+-IgM陽(yáng)性率均降低（p=0.016、p=0.022）。 2.IRP初治組、恢復(fù)組患者骨髓IL-2水平（5.64±1.70，6.19±2.53）顯著低于正常對(duì)照組（7.91±3.71）（p<0.05），初治組低于恢復(fù)組，

8、但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；IRP初治組、恢復(fù)組患者骨髓TGF-β水平（1.79±0.67，1.86±0.77）顯著低于正常對(duì)照組（2.48±0.94）（p<0.05），初治組低于恢復(fù)組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；IRP初治組患者骨髓中CD4+CD25+/CD4+細(xì)胞數(shù)量（22.46±9.47）明顯減低，低于正常對(duì)照組（30.59±8.58）（p均<0.05），而恢復(fù)組與正常對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；

9、IRP初治組患者骨髓CD4+CD25+CD127-/CD4+細(xì)胞數(shù)量（7.18±2.72）明顯低于正常對(duì)照組（10.44±3.24）（p<0.05），而恢復(fù)組與正常對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）；初治組、恢復(fù)組、正常對(duì)照組三組FoxP3 mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為（0.34±0.25）、（0.69±0.51）和（0.82±0.65），初治組明顯低于恢復(fù)組和正常對(duì)照組（p均<0.05），初治組、恢復(fù)組、正常對(duì)照組Galecti