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1、 本實(shí)驗(yàn)研究了AT1受體抗體對(duì)心血管功能的影響及其機(jī)制,實(shí)驗(yàn)分以下五項(xiàng)內(nèi)容:探討了抗血管緊張素AT1受體抗體的制備過程。利用人工合成的人AT1受體細(xì)胞外第二環(huán)表位功能肽段,主動(dòng)免疫大鼠,使其產(chǎn)生高滴度的抗AT1受體抗肽抗體,借以進(jìn)行抗體對(duì)心血管活動(dòng)的生物學(xué)效應(yīng)研究。 使用抗原肽段對(duì)Wistar大鼠進(jìn)行主動(dòng)免疫,獲取抗AT1受體抗血清,其效價(jià)用SA-ELISA方法檢測(cè)。然后利用MAbTrapKit試劑盒對(duì)抗血清中的抗體IgG
2、進(jìn)行提取和純化。純化后的抗體蛋白液混合后,先經(jīng)PAGE膠凝膠電泳檢測(cè)其純度,然后使用考馬斯亮蘭試劑盒對(duì)抗體進(jìn)行定量。 利用大鼠離體主動(dòng)脈血管環(huán)觀察了AT1受體抗體對(duì)血管收縮功能的影響,證實(shí)該抗體與血管緊張素Ⅱ一樣均可劑量依賴性地增加血管環(huán)收縮張力,其效應(yīng)通過對(duì)血管上AT1受體的激動(dòng)劑樣刺激效應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。綜上所述,我們?cè)诒狙芯恐凶C實(shí)了AT1受體抗體對(duì)心臟有明顯的正性肌力效應(yīng),和增加血管平滑肌收縮的功能,提示它們可能是參與心血管疾病發(fā)
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