鹽脅迫下紫花苜蓿根系蛋白質(zhì)組的初步分析.pdf

1、土地鹽堿化是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境的嚴(yán)重問題.利用生物技術(shù)提高牧草和農(nóng)作物耐鹽堿性,可以實(shí)現(xiàn)對鹽堿地的有效利用和改良,而克隆耐鹽堿相關(guān)基因、研究耐鹽堿調(diào)控機(jī)制,是通過基因工程手段提高植物耐鹽堿性的基礎(chǔ). 本文以高耐鹽苜蓿品種"中苜一號"為試驗(yàn)材料,應(yīng)用雙向凝膠電泳技術(shù)對其根系蛋白質(zhì)組的表達(dá)譜進(jìn)行差異分析.本試驗(yàn)對雙向電泳的一些重要技術(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)行探討,對其過程中蛋白質(zhì)樣品的制備、等電聚焦、平衡、凝膠染色等幾個(gè)重要環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化.通過

2、比較研究,得出酚抽提法適合紫花苜蓿根系總蛋白質(zhì)的提取;改良的膠體考馬斯亮蘭方法是較靈敏且重復(fù)性高的蛋白質(zhì)染色方法;建立了適合紫花苜蓿的2-DE技術(shù)平臺.采用優(yōu)化的雙向電泳方法,對鹽脅迫下苜蓿根系蛋白質(zhì)組進(jìn)行差異分析,共得到533個(gè)蛋白點(diǎn),其中59個(gè)蛋白點(diǎn)表達(dá)量發(fā)生改變,改變量超過2倍,其中17個(gè)蛋白點(diǎn)表達(dá)量上調(diào),42個(gè)蛋白點(diǎn)表達(dá)量下將,并對其分子量、pH值進(jìn)行了初步理論鑒定.本試驗(yàn)將蛋白質(zhì)組學(xué)的新方法應(yīng)用于苜?？鼓鏅C(jī)制的研究,也展示了可