HLA-DRB1等位基因多態(tài)性和乙肝病毒基因型與慢性乙型肝炎α-干擾素抗病毒治療應(yīng)答的相關(guān)性研究.pdf

1、　　目的：
　　探討山東省乙肝病毒基因型的分布情況及其與慢性乙型肝炎α-干擾素抗病毒治療應(yīng)答的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.研究對(duì)象 249例慢性HBV-DNA陽性者均為我院2002年2月至2003年10月門診和住院病人,男186例,女63例,平均年齡33.8±14.6歲,其中無癥狀攜帶者(ASC)53例,慢性肝炎(CAH)126例,肝硬化(LC)38例,重型肝炎(FHF)32例,所有病例和對(duì)照均為山東地區(qū)的華人漢族人

2、,診斷均符合2000年全國(guó)病毒性肝炎會(huì)議制定的標(biāo)準(zhǔn)。通過適當(dāng)?shù)呐R床和實(shí)驗(yàn)室方法排除所有引起慢性肝病的其他因素,如HCV感染、自身免疫性肝炎、酒精性肝炎和代謝失調(diào)。所有病例均無抑郁癥病史、免疫缺陷病毒感染、應(yīng)用干擾素史、化療或其他可影響治療結(jié)果的試劑、甲狀腺功能異常等。
　　α-干擾素治療組包括126例慢性乙型肝炎患者(男性94例,女性32例,平均年齡：33.2±13.3歲)。
　　2.血清學(xué)檢驗(yàn) 血清用來檢測(cè)肝功能、乙肝五項(xiàng)

3、病毒學(xué)指標(biāo)(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBe)及HBV-DNA,剩余血清在-70℃保存?zhèn)溆谩?br>　　3.HBV基因分型HBV-DNA應(yīng)用直接煮沸法從200μL血清樣本中提取,用巢式PCR擴(kuò)增,引物均參考文獻(xiàn)。第一輪PCR在一含40 μL反應(yīng)緩沖液的試管中進(jìn)行,包含4μL HBV-DNA,4μL 10×buffer,4μL濃度為15mM的MgCl2,4μL濃度為10mM的dNTPs,0.2μL濃度為5U/μL