硫酸銦遺傳毒性機(jī)制及Vc拮抗作用的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:銦(indium,In)是一種稀散金屬元素,因其具有獨(dú)特的物理和化學(xué)性能,近年來(lái)已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用,成為現(xiàn)代電子工業(yè)中必不可少的功能材料之一。吸收入血的銦迅速轉(zhuǎn)運(yùn)到軟組織和骨骼。膠體狀的銦被白細(xì)胞吞噬后送到肝和脾的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)。進(jìn)入體內(nèi)的銦主要經(jīng)尿及糞從體內(nèi)排出,其經(jīng)尿排泄過(guò)程可分兩個(gè)時(shí)期開(kāi)始為快排泄期,大約為20天,然后則為長(zhǎng)時(shí)間的緩慢排泄期,可達(dá)數(shù)月或數(shù)年。銦的可溶性化合物都是有毒的,硫酸銦(indiumsulfate)是具有代

2、表性的銦的可溶性化合物,是銦冶煉作業(yè)過(guò)程中工人接觸的主要職業(yè)危害因素之一。
   本實(shí)驗(yàn)旨在研究體外實(shí)驗(yàn)條件下硫酸銦對(duì)V79細(xì)胞DNA和染色體的損傷效應(yīng),探討硫酸銦的遺傳毒性,并從細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的釋放和線粒體膜電位(△ψm)變化方面研究硫酸銦引起V79細(xì)胞損傷的機(jī)制以及維生素C(Vc)對(duì)該損傷的拮抗作用,以尋找有效的拮抗劑,為今后做好銦環(huán)境暴露的預(yù)防工作,保護(hù)職業(yè)接觸人群提供部分相關(guān)資料。
   方法:本研究分為

3、三個(gè)部分。第一部分:以V79細(xì)胞為研究對(duì)象,通過(guò)MTT法研究硫酸銦對(duì)細(xì)胞的一般毒性,觀察不同濃度硫酸銦染毒不同時(shí)間時(shí)細(xì)胞存活率的變化,并了解濃度-時(shí)間-毒性效應(yīng)之間的關(guān)系,為后期深入研究提供理論依據(jù);第二部分:在第一部分確定的硫酸銦染毒劑量范圍內(nèi),觀察不同時(shí)間,不同濃度下硫酸銦對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA及染色體的影響,用單細(xì)胞凝膠電泳(SCGE)技術(shù),觀察硫酸銦對(duì)V79細(xì)胞DNA的損傷情況,并計(jì)算微核率和微核細(xì)胞比率,觀察硫酸銦對(duì)V79細(xì)胞染色體的

4、影響;第三部分:在第二部分的基礎(chǔ)上,從細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的釋放和線粒體膜電位(△ψm)變化方面深入探討硫酸銦致DNA和染色體損傷的作用機(jī)制,并研究Vc的拮抗作用,觀察在Vc存在的條件下,硫酸銦對(duì)V79細(xì)胞DNA損傷的變化。
   結(jié)果:硫酸銦從0.5 mmol/L開(kāi)始即對(duì)V79細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制作用,細(xì)胞存活率呈濃度-時(shí)間依賴性降低,當(dāng)硫酸銦濃度為1mmol/L時(shí),V79細(xì)胞開(kāi)始發(fā)生形態(tài)學(xué)改變,濃度為8mmol/L時(shí),細(xì)胞存活

5、率大幅度降低。在硫酸銦作用下,細(xì)胞內(nèi)DNA出現(xiàn)損傷,拖尾率,Tail DNA%,尾長(zhǎng),Olive尾矩隨染毒濃度增大而增加,同時(shí)染色體出現(xiàn)變化,細(xì)胞微核率和微核細(xì)胞比率也隨染毒濃度增大而增加;在硫酸銦的作用下,細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)增多,線粒體膜電位(△ψm)下降,兩者與硫酸銦濃度呈劑量-效應(yīng)關(guān)系;一定濃度的Vc在一定程度上拮抗硫酸銦引起的V79細(xì)胞DNA損傷,可能與拮抗硫酸銦所致V79細(xì)胞內(nèi)ROS增加和Δψm下降有關(guān)。
   結(jié)

6、論:本研究結(jié)果顯示:硫酸銦低濃度、短時(shí)間染毒即可明顯抑制V79細(xì)胞增殖;硫酸銦可以引起V79細(xì)胞DNA和染色體的改變,具有明顯的遺傳毒性;硫酸銦引起V79細(xì)胞內(nèi)ROS增加和Δψm下降,表明硫酸銦能通過(guò)氧化作用,損傷V79細(xì)胞DNA結(jié)構(gòu),以及影響細(xì)胞內(nèi)線粒體的穩(wěn)定性,造成細(xì)胞凋亡。一定濃度的Vc可以在一定程度上拮抗硫酸銦引起的細(xì)胞內(nèi)ROS的增加和△ψm的下降,拮抗DNA損傷效應(yīng)。綜合結(jié)果,本文認(rèn)為硫酸銦通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)活性氧的釋放,破壞細(xì)胞

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