羊膜提取液對兔準分子激光術(shù)后haze的影響機制.pdf

1、目的:
　　探討羊膜提取液(amniotic extraction, AE)對準分子激光屈光性角膜切削術(shù)(photorefractive keratectomy, PRK)后傷口愈合過程的影響及減輕PRK術(shù)后角膜上皮下霧狀混濁(haze)的作用機制。
　　方法:
　　健康無眼疾的27只新西蘭大白兔(54只眼),采用完全隨機分組設(shè)計方案,隨機分為三組(實驗組、激素組與空白組),每組9只兔(18只眼)。制造PRK動物模型(

2、PTK模式下去除兔角膜上皮,PRK治療模式下按-10D、6.5mm切削直徑進行角膜切削)。術(shù)后實驗組滴用AE,激素組用0.1％磷酸地塞米松眼液,空白組用不含AE的賦形劑,術(shù)后每天觀察眼部大體情況。于1、4、8W處死每組3只實驗兔,取雙眼角膜組織,采用光鏡觀察角膜切削區(qū)中央上皮的恢復情況,免疫熒光染色檢測α-平滑肌肌動蛋白(alpha-smooth musclea actin,α-SMA)、CD11b,原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的dUT

3、P缺口末端標記(TUNEL)檢測角膜基質(zhì)細胞的凋亡,并進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果:
　　1、術(shù)后1W,光學顯微鏡下見,三組的角膜上皮細胞均已完全覆蓋激光切削面,上皮基底細胞大小不均,上皮細胞層間排列極不規(guī)則,基質(zhì)淺層有較多角膜基質(zhì)細胞積聚。術(shù)后4W,激素組和空白對照組基質(zhì)淺層內(nèi)較多新生膠原,排列不規(guī)則,失去板層結(jié)構(gòu),瘢痕形成。術(shù)后8W,三組角膜上皮仍未恢復至正常,角膜激素組和空白組基質(zhì)淺層見大量新生膠原纖維,排列極不規(guī)則(圖

4、1-4)。
　　2、術(shù)后1、4、8W CD11b在三組均未見明顯陽性細胞表達。三組比較無統(tǒng)計學差異。
　　3、術(shù)后1W TUNEL陽性細胞在三組均有表達,AE組較空白對照組、激素組的陽性細胞明顯減少;術(shù)后4W TUNEL陽性細胞在空白對照組有表達,AE組、激素組未見明顯的陽性細胞表達(p<0.01)。術(shù)后8W三組均未見明顯凋亡陽性細胞的表達。
　　4、術(shù)后1、4、8Wα-SMA在空白對照組、激素組的角膜基質(zhì)淺層均有陽性