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1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文肝癌特異性結(jié)合肽篩選及合成的實(shí)驗(yàn)研究姓名:朱小華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:吳華2003.4.1華中科技大學(xué)嗣濟(jì)醫(yī)學(xué)院禧士學(xué)位論文ABSTRACTObjective:Thepresentstudywasperformedtoscreenandisolatehomingpeptidesthatbindspecifically,orpreferentially,tohepatocarcinoma
2、cellsusingphagedisplayofrandompeptidelibrariesandwholecellpanningtechniquewiththepurposeofdevelopinganewpeptidewhichmaybeusedasthecarrierindiagnosticimagingordrug—targetdeliveryMethods:Apeptide12一merphagedisplay1ibrarywa
3、susedtoisolatepeptidethatbindtohumanhepatocarcinomacell,andfourroundssubtractivepanningwerecarriedoutwiththehumanhepatocarcinomacell1ineHepG2asthetargetTheaffinitiesofselectedphageclonestohumanhepatocarcinomacellweredete
4、rminedwithELISAandcomparedwithhumaniivercellandothertumorcellSrespectivelyThesinglestrandedDNAofphagesthatbindhumanhepatocarcinomacellspecificallywereextractedandpurified,thentheiraminoacidsequenceswerededucedthoughDNAse
5、quencingInaddition,imunofluorescenceanalysisbyconfocal1ightmicroscopywasperformedtoobservethebindingsiteA16merpeptide(1】|IHl6)wassynthesizedaccordingtotheDNAsequenceresultsItwaspurifiedbyreverse—phasehigh—performanceliqu
6、idchromatographyMassspectrometrywasusedtoconfirmthepredictedmaSSThebindingabilityofWIll6WaSdeterminedwithcompetitiveinhibitiontestResults:Afterfourroundspanning,thephagethatboundtoandinternalizedinhumanhepatocarcinomacel
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