金線蓮多糖對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、多糖是金線蓮重要的有效成分之一,含量豐富,藥理活性廣泛。目前對(duì)金線蓮多糖提取方法和免疫增強(qiáng)作用的研究已取得一定進(jìn)展,但是相關(guān)機(jī)理研究尚鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究以福建道地藥材金線蓮為試驗(yàn)材料,對(duì)其進(jìn)行超微粉碎并過(guò)300目篩；用水提醇沉法聯(lián)合超聲波法提取金線蓮超微粉多糖,通過(guò)單因素試驗(yàn),確定多糖的最佳提取條件,并對(duì)多糖進(jìn)行初步純化,用苯酚-硫酸法測(cè)定多糖的含量。將不同劑量金線蓮多糖給予環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠和健康小鼠,通過(guò)測(cè)定小鼠免疫器官、免疫細(xì)胞

2、、免疫分子等指標(biāo)考察金線蓮多糖對(duì)免疫抑制小鼠和健康小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　 試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 1.單因素提取試驗(yàn)結(jié)果表明,金線蓮多糖合適的提取條件為超聲頻率80KHz、料液比1:30、溫度70℃、時(shí)間1h、提取次數(shù)2次,以此作為本研究金線蓮多糖的提取條件。結(jié)果金線蓮多糖的平均得率為7.14％。苯酚一硫酸法測(cè)得金線蓮多糖總含量為87.62％。
　　 2.金線蓮多糖對(duì)免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用
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3、.1金線蓮多糖對(duì)免疫抑制小鼠免疫器官的影響金線蓮多糖能促進(jìn)免疫抑制小鼠體重的增長(zhǎng)；三個(gè)劑量組脾指數(shù)和胸腺指數(shù)顯著高于CY模型組,其中小劑量組和大劑量組脾重顯著高于CY模型組,大劑量組胸腺重顯著高于CY模型組。說(shuō)明金線蓮多糖具有促進(jìn)免疫抑制小鼠免疫器官生長(zhǎng)的作用。
　　 2.2金線蓮多糖對(duì)免疫抑制小鼠免疫細(xì)胞的影響碳廓清試驗(yàn)結(jié)果表明金線蓮多糖小劑量組和中劑量組吞噬指數(shù)顯著高于CY模型組,說(shuō)明這兩個(gè)劑量組能促進(jìn)免疫抑制小鼠的吞噬功能

4、；MTT法測(cè)定小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的試驗(yàn)結(jié)果顯示,金線蓮多糖三個(gè)劑量組OD值顯著高于CY模型組,說(shuō)明金線蓮多糖具有促進(jìn)免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的作用。
　　 2.3金線蓮多糖對(duì)免疫抑制小鼠免疫因子的影響用ELISA試劑盒檢測(cè)細(xì)胞因子含量的結(jié)果表明,金線蓮多糖三個(gè)劑量組TNF—α、IFN—γ含量高于CY模型組且差異極顯著,中劑量組和大劑量組IL-6含量顯著高于CY模型組。說(shuō)明金線蓮多糖中劑量和大劑量能促進(jìn)免疫抑制小鼠細(xì)胞因子的分泌

5、,提高其含量。用比濁法測(cè)定免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量和補(bǔ)體C3、C4含量結(jié)果表明,金線蓮多糖大劑量組IgA含量顯著高于CY模型組；中劑量組和大劑量組Igm含量顯著高于CY模型組；中劑量組IgG含量顯著高于CY模型組。中劑量組和大劑量組C3含量顯著高于CY模型組；小劑量組和中劑量組C4含量顯著高于CY模型組。說(shuō)明金線蓮多糖對(duì)免疫抑制小鼠免疫因子的分泌具有促進(jìn)作用。
　　 3.金線蓮多糖對(duì)健康小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用
　　

6、 3.1金線蓮多糖對(duì)健康小鼠免疫器官的影響金線蓮多糖三個(gè)劑量組都能促進(jìn)健康小鼠體重增長(zhǎng),三個(gè)劑量組脾重顯著高于空白組,小劑量組和大劑量組胸腺重顯著高于空白組；大劑量組脾指數(shù)顯著高于空白組,中劑量組和大劑量組胸腺指數(shù)顯著高于空白組。說(shuō)明金線蓮多糖具有促進(jìn)健康小鼠免疫器官增重和免疫器官指數(shù)提高的作用。
　　 3.2金線蓮多糖對(duì)健康小鼠免疫細(xì)胞的影響碳廓清試驗(yàn)結(jié)果表明金線蓮多糖中劑量組和大劑量組吞噬指數(shù)顯著高于空白組,說(shuō)明這兩個(gè)劑量

7、組能促進(jìn)健康小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能；MTT法測(cè)定脾淋巴細(xì)胞增殖的試驗(yàn)結(jié)果顯示,金線蓮多糖三個(gè)劑量組OD值與空白組比較無(wú)顯著差異,說(shuō)明金線蓮多糖對(duì)健康小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖影響不顯著。
　　 3.3金線蓮多糖對(duì)健康小鼠免疫因子的影響用ELISA試劑盒檢測(cè)健康小鼠血清細(xì)胞因子含量的結(jié)果表明,金線蓮多糖三個(gè)劑量組對(duì)IL-6含量的影響不顯著,中劑量組和大劑量組TNF—α含量、IFN—γ含量顯著高于空白組；用比濁法測(cè)定健康小鼠血清免疫球蛋白I