金線蓮多糖對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、多糖是金線蓮重要的有效成分之一,含量豐富,藥理活性廣泛。目前對金線蓮多糖提取方法和免疫增強作用的研究已取得一定進展,但是相關(guān)機理研究尚鮮見報道。本研究以福建道地藥材金線蓮為試驗材料,對其進行超微粉碎并過300目篩；用水提醇沉法聯(lián)合超聲波法提取金線蓮超微粉多糖,通過單因素試驗,確定多糖的最佳提取條件,并對多糖進行初步純化,用苯酚-硫酸法測定多糖的含量。將不同劑量金線蓮多糖給予環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠和健康小鼠,通過測定小鼠免疫器官、免疫細胞

2、、免疫分子等指標考察金線蓮多糖對免疫抑制小鼠和健康小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　 試驗結(jié)果如下:
　　 1.單因素提取試驗結(jié)果表明,金線蓮多糖合適的提取條件為超聲頻率80KHz、料液比1:30、溫度70℃、時間1h、提取次數(shù)2次,以此作為本研究金線蓮多糖的提取條件。結(jié)果金線蓮多糖的平均得率為7.14％。苯酚一硫酸法測得金線蓮多糖總含量為87.62％。
　　 2.金線蓮多糖對免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用
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3、.1金線蓮多糖對免疫抑制小鼠免疫器官的影響金線蓮多糖能促進免疫抑制小鼠體重的增長；三個劑量組脾指數(shù)和胸腺指數(shù)顯著高于CY模型組,其中小劑量組和大劑量組脾重顯著高于CY模型組,大劑量組胸腺重顯著高于CY模型組。說明金線蓮多糖具有促進免疫抑制小鼠免疫器官生長的作用。
　　 2.2金線蓮多糖對免疫抑制小鼠免疫細胞的影響碳廓清試驗結(jié)果表明金線蓮多糖小劑量組和中劑量組吞噬指數(shù)顯著高于CY模型組,說明這兩個劑量組能促進免疫抑制小鼠的吞噬功能

4、；MTT法測定小鼠脾淋巴細胞增殖的試驗結(jié)果顯示,金線蓮多糖三個劑量組OD值顯著高于CY模型組,說明金線蓮多糖具有促進免疫抑制小鼠脾淋巴細胞增殖的作用。
　　 2.3金線蓮多糖對免疫抑制小鼠免疫因子的影響用ELISA試劑盒檢測細胞因子含量的結(jié)果表明,金線蓮多糖三個劑量組TNF—α、IFN—γ含量高于CY模型組且差異極顯著,中劑量組和大劑量組IL-6含量顯著高于CY模型組。說明金線蓮多糖中劑量和大劑量能促進免疫抑制小鼠細胞因子的分泌

5、,提高其含量。用比濁法測定免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量和補體C3、C4含量結(jié)果表明,金線蓮多糖大劑量組IgA含量顯著高于CY模型組；中劑量組和大劑量組Igm含量顯著高于CY模型組；中劑量組IgG含量顯著高于CY模型組。中劑量組和大劑量組C3含量顯著高于CY模型組；小劑量組和中劑量組C4含量顯著高于CY模型組。說明金線蓮多糖對免疫抑制小鼠免疫因子的分泌具有促進作用。
　　 3.金線蓮多糖對健康小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用
　　

6、 3.1金線蓮多糖對健康小鼠免疫器官的影響金線蓮多糖三個劑量組都能促進健康小鼠體重增長,三個劑量組脾重顯著高于空白組,小劑量組和大劑量組胸腺重顯著高于空白組；大劑量組脾指數(shù)顯著高于空白組,中劑量組和大劑量組胸腺指數(shù)顯著高于空白組。說明金線蓮多糖具有促進健康小鼠免疫器官增重和免疫器官指數(shù)提高的作用。
　　 3.2金線蓮多糖對健康小鼠免疫細胞的影響碳廓清試驗結(jié)果表明金線蓮多糖中劑量組和大劑量組吞噬指數(shù)顯著高于空白組,說明這兩個劑量

7、組能促進健康小鼠巨噬細胞的吞噬功能；MTT法測定脾淋巴細胞增殖的試驗結(jié)果顯示,金線蓮多糖三個劑量組OD值與空白組比較無顯著差異,說明金線蓮多糖對健康小鼠脾淋巴細胞增殖影響不顯著。
　　 3.3金線蓮多糖對健康小鼠免疫因子的影響用ELISA試劑盒檢測健康小鼠血清細胞因子含量的結(jié)果表明,金線蓮多糖三個劑量組對IL-6含量的影響不顯著,中劑量組和大劑量組TNF—α含量、IFN—γ含量顯著高于空白組；用比濁法測定健康小鼠血清免疫球蛋白I