低氘水對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、一、研究目的
　　 自然界的水中氘(Deuterium，D)的體積分?jǐn)?shù)為0.015％，而低于這個(gè)體積分?jǐn)?shù)的水就稱為低氘水(deuterium-depleted water,DDW)。氕和氘由于質(zhì)量不同導(dǎo)致氫的這兩種穩(wěn)定核素之間物理和化學(xué)性質(zhì)的不同。研究發(fā)現(xiàn)，飲用25％～30％重水可以提高腹水瘤存活期，抑制小鼠成纖維L929細(xì)胞的生長(zhǎng)速率和引起移植瘤小鼠腫瘤組織消退。我項(xiàng)目組在國(guó)內(nèi)率先進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)表明在體外情況下，低氘水對(duì)肺癌細(xì)

2、胞增殖有抑制作用，而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)影響，推測(cè)低氘水可能是通過(guò)將腫瘤細(xì)胞阻滯在S期，并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡而在體內(nèi)外表現(xiàn)出一定的抗腫瘤特性。另外，低氘水也可以提高衰老模型小鼠心肝腦血中各種氧化指標(biāo)含量，證實(shí)其具有一定抗氧化能力。本實(shí)驗(yàn)是在這些研究的基礎(chǔ)上，對(duì)低氘水的免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行探討，進(jìn)一步解釋其抗腫瘤特性，為今后輔助腫瘤治療提供實(shí)驗(yàn)室資料。
　　 二、研究方法
　　 將ICR雄性小鼠(18～22g)隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。兩

3、組均正常飼養(yǎng)，對(duì)照組以自來(lái)水作為飲用水，實(shí)驗(yàn)組以低氘水作為飲用水。飼養(yǎng)40d后，頸椎脫臼，進(jìn)行下述免疫指標(biāo)的測(cè)定。
　　 (一)非特異性免疫
　　 實(shí)驗(yàn)包括計(jì)算小鼠的脾臟指數(shù)，胸腺指數(shù)。
　　 (二)體液免疫
　　 實(shí)驗(yàn)包括ELISA法測(cè)小鼠外周血中免疫球蛋白IgM,IgG的含量。
　　 (三)細(xì)胞免疫
　　 實(shí)驗(yàn)包括MTT法測(cè)ConA刺激脾淋巴細(xì)胞增殖，遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)，乳酸脫氫

4、酶測(cè)NK細(xì)胞活性和流式細(xì)胞術(shù)測(cè)T細(xì)胞亞群CD4+,CD8+以及CD4+/CD8+的變化。
　　 (四)淋巴器官病理學(xué)改變及生理特征評(píng)價(jià)
　　 對(duì)兩組小鼠的脾臟及胸腺進(jìn)行染色，鏡下觀察病理學(xué)改變，并依據(jù)相關(guān)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)生理特征進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　 三、研究結(jié)果
　　 (一)非特異性免疫
　　 低氘水對(duì)脾臟指數(shù)有非常顯著的提高(3.93±0.35)vs(3.45±0.28)(P＜0.01)，對(duì)胸腺指數(shù)的提高

5、沒(méi)有顯著差異性。
　　 (二)體液免疫
　　 低氘水可以顯著提高血清中IgM的含量(1.10±0.10)vs(0.97±0.05)(P＜0.01)，IgG的含量有提高但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (三)細(xì)胞免疫
　　 用MTT法測(cè)定ConA刺激的小鼠淋巴細(xì)胞增殖，DNFB攻擊小鼠兩耳，以及LDH法測(cè)NK細(xì)胞活性，其結(jié)果均顯示實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組沒(méi)有顯著差異。運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)T細(xì)胞亞群的數(shù)值進(jìn)行測(cè)量，實(shí)驗(yàn)組中CD4+

6、(67.69±7.83)vs(54.04±9.19)和CD4+/CD8+(2.31±0.84)vs(1.27±0.48)的含量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，而CD8+的含量則顯著低于對(duì)照(P＜0.05)。
　　 (四)淋巴器官病理學(xué)改變及生理特征評(píng)價(jià)
　　 經(jīng)過(guò)HE染色，病理讀片結(jié)果表明，受試物低氘水對(duì)小鼠脾臟和胸腺?zèng)]有影響。生理特征評(píng)價(jià)表明低氘水不會(huì)對(duì)小鼠生理特征有損害作用。
　　 四、結(jié)論
　　 低