不同宿主足螨的形態(tài)學(xué)觀察及ITS-2基因序列分析研究.pdf

1、足螨屬于癢螨科(Psoroptidae)、足螨屬(Chorioptes)，是一種呈世界性分布的感染家畜及野生動(dòng)物的體外寄生蟲。目前，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為足螨屬的螨可以分為牛足螨(Chorioptes bovis)和德州足螨(Chorioptes texanus)兩個(gè)種，但是一部分學(xué)者對(duì)此分類方法提出了質(zhì)疑，他們認(rèn)為此分類方法僅僅依據(jù)了足螨的形態(tài)學(xué)和生物學(xué)方面的特征，而沒有考慮到遺傳學(xué)方面的因素。此外，由于對(duì)寄生于一些動(dòng)物的足螨的研究還不夠深入，

2、如大熊貓足螨(C.panda，F(xiàn)ain andLeclerc,1975)、羚羊足螨(C.crewei，Lavoipierre,1958)以及獾足螨(C.mydaus，F(xiàn)ain，1975)等，這些足螨究竟是牛足螨與德州足螨的同種異名還是獨(dú)立種還有待進(jìn)一步的研究證實(shí)。 本試驗(yàn)以采自四川雙流黃牛的足螨，洪雅西門達(dá)爾奶牛、黑白花奶牛、蒙貝利亞奶牛的足螨以及成都大熊貓繁育研究基地的大熊貓的足螨為試驗(yàn)材料，首先對(duì)采自黃牛和大熊貓的足螨進(jìn)行形

3、態(tài)學(xué)觀察，再將寄生于上述五種動(dòng)物的足螨ITS-2基因進(jìn)行克隆和序列分析。采用光鏡和掃描電鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，結(jié)果表明：兩種足螨的雄螨體末突出物均由大小兩節(jié)組成，突出物上竹片狀剛毛和最外側(cè)剛毛的長(zhǎng)度分別介于168μm-255μm和43μm-80μm之間，與德州足螨基本相同，而其中寄生于大熊貓的足螨比寄生與黃牛的足螨蟲體大。采用PCR方法成功擴(kuò)增出上述五種足螨的ITS-2基因全序列，在Genbank上的注冊(cè)號(hào)分別為：寄生于西門達(dá)爾奶牛的足螨(

4、EF053119)、寄生于黃牛的足螨(EF053121)、寄生于黑白花奶牛的足螨(EF053120)、寄生于蒙貝利亞奶牛的足螨(EF053122)、寄生于大熊貓的足螨(EF053123)，分析結(jié)果顯示：采自大熊貓的足螨ITS-2基因全序列長(zhǎng)度為232bp，比Genbank上注冊(cè)的德州足螨(AF123082)、牛足螨(AF123081)ITS-2基因全序列略長(zhǎng)，與之的同源性分別為85.6％和90.4％。其余四種足螨的ITS-2基因中，采自

5、西門達(dá)爾奶牛的足螨ITS-2基因全序列為 228bp，與德州足螨的ITS-2基因全序列長(zhǎng)度相同，其余3種足螨的ITS-2基因長(zhǎng)度為225bp，與牛足螨的ITS-2基因長(zhǎng)度相同。但以上4種足螨的ITS-2基因與德州足螨 ITS-2 基因同源性較高，介于94.2％-97.8％之間，而與牛足螨ITS-2基因的同源性較低，僅在84.3％-87.0％之間。 除上述5種足螨的ITS-2基因以外，還選用癢螨科(Psoroptidae)癢螨屬(

6、Psoroptes)的兔癢螨(Psoroptes cuniculi)ITS-2基因(AB105201)作為外群，加上Genbank上公布癢螨科足螨屬的德州足螨分離株ITS-2基因和牛足螨分離株ITS-2 基因的序列構(gòu)建 ITS-2 基因的各種系統(tǒng)樹。從構(gòu)建的系統(tǒng)樹分析：寄生于大熊貓的足螨與牛足螨、德州足螨的親緣關(guān)系均較遠(yuǎn)，其余四種足螨與德州足螨的親緣關(guān)系較近。 根據(jù)形態(tài)學(xué)和ITS-2基因序列分析結(jié)果綜合分析得出：寄生于大熊貓的熊