不同宿主感染REV情況調(diào)查及分離株gp90基因序列分析.pdf

1、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥（Reticuloendotheliosis，RE）是指由網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒(Reticuloendotheliosis virus，REV)引起的禽類的一種重要的免疫抑制病和致瘤性疾病，包括急性網(wǎng)狀細(xì)胞腫瘤、生長(zhǎng)抑制、淋巴組織和其他組織慢性腫瘤形成的病理綜合癥。REV不僅可以單獨(dú)使禽類致病，也可與其他疾病混和感染，降低禽類對(duì)其他疾病的抵抗力，給禽類養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。REV的常見(jiàn)宿主為雞、鴨等家禽，同時(shí)REV亦

2、可感染野生鳥類。
　　為了解不同宿主對(duì)REV的感染情況，從全國(guó)各地采集了不同宿主來(lái)源的樣品1563份，對(duì)其進(jìn)行初步PCR檢測(cè)，從不同宿主來(lái)源的樣品中得到68份陽(yáng)性樣品，將陽(yáng)性樣品適當(dāng)處理后接種DF-1細(xì)胞，利用IFA、PCR復(fù)檢等方法檢測(cè)后得到7株REV分離株，分別為CH120057株、CH120099株、CH120220株、CH120276株、CH120277株、WB11042株和WB11043株。分別從不同宿主陽(yáng)性檢出率和分離

3、率、不同品種的雞陽(yáng)性檢出率、不同品種的野鳥的陽(yáng)性檢出率和不同品種的水禽檢出率4個(gè)角度對(duì)不同宿主來(lái)源感染REV的情況進(jìn)行分析，推斷得出雞仍是REV的主要宿主。由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)我們分析推測(cè)不同品種的雞樣品中蛋雞可能比其他品種的雞更易感染REV，其次是肉雞;小型雀形目鳥類比雁鴨類野鳥陽(yáng)性感染率高;與鵝相比，鴨子是目前我國(guó)水禽類REV的主要宿主。
　　以所分離的REV的病毒全基因組cDNA為模板，用REV特異性引物擴(kuò)增gp90基因片段。PCR產(chǎn)

4、物經(jīng)回收、純化后，克隆至pMD-18T載體，隨機(jī)選取3個(gè)陽(yáng)性克隆進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序結(jié)果表明分離的7株REV的gp90基因閱讀框架全長(zhǎng)均為1191bp，編碼397氨基酸，未出現(xiàn)任何缺失和插入。通過(guò)遺傳進(jìn)化樹分析結(jié)果顯示，CH120057株、WB11043株、CH120057株在同一支上，同另一支上的CH120220株、CH12076株與ZD0708株親緣關(guān)系較近，可能與ZD0708株存在共同祖先，gp90基因目前較保守還未出現(xiàn)較嚴(yán)重的突變，但