椎板切除術后脊柱的不穩(wěn)對硬膜外瘢痕形成的影響和預防的實驗研究.pdf

1、目的:分析比較椎板切除術后脊柱的不穩(wěn)是否是影響硬膜外瘢痕形成的重要原因以及椎板切除術后鋼絲固定與自體移植脂肪對硬脊膜外瘢痕形成的影響.方法:SD大鼠128只,隨機分為16小組,每組8只,行L3全椎板切除,分別為棘突間鋼絲固定與移植脂肪組(IF組),單純鋼絲固定組(I組),移植脂肪組(F組)及對照組(C組).術后2、4、6、8周處死動物,分別大體觀察.觀察評分標準采用Rydell大體評分標準.瘢痕面積測定:取Masson三色法染色切片每組

2、8張,共128枚,用American image-proplus計算機圖象分析系統(tǒng)對病理切片中瘢痕面積進行測量.硬膜外側瘢痕的測量范圍:自硬膜后緣向后1/2個椎管前后徑處劃一水平線,測量該線前方的所有瘢痕面積,將每張切片的瘢痕面積相加求值后除以椎間盤的面積,即為該標本的瘢痕面積指數(shù).成纖維細胞及炎性細胞的測定:HE染色組織切片取同一放大率的瘢痕組織圖像(640x),直接輸入計算機,在顯示器上用鼠標器對成纖維細胞和炎性細胞進行計數(shù).為了減

3、少誤差,每標本計數(shù)3個不同的視野,一個位于中央,兩個位于邊緣.且由一位不知實驗過程及實驗原理的病理醫(yī)師計數(shù).免疫組化方法:病理組織切片以CD34單克隆抗體作為第一抗體,按照免疫組織化學SP步驟進行,DAB顯色,蘇木素復染,每組用0.01mmol/l的PBS液替代CD34抗體作陰性對照(試劑購自于武漢博士德公司),應用免疫組化顯示血管,對不同時期的血管生成情況及早期的炎性反映情況進行觀察.生化定量膠原蛋白含量檢查:應用許志勤<'[2]>等