缺血預(yù)處理聯(lián)合PDTC對(duì)肺實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡及NF-Κb的影響.pdf

1、目的：通過(guò)觀察缺血預(yù)處理聯(lián)合NF-κb的特異性抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)對(duì)肺實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡、核因子-κb(NF-κb)及肺功能的影響，探討缺血預(yù)處理聯(lián)合PDTC對(duì)肺臟組織缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制。 方法：選擇健康新西蘭大白兔18只，隨機(jī)分為缺血再灌注組(ischemic reperfusion，IR)，缺血預(yù)處理組(ischemic preconditioning

2、，IPC)及缺血預(yù)處理聯(lián)合PDTC組(IPC+PDTC)，每組6只。IR組：麻醉平穩(wěn)后，阻斷左肺門致肺缺血，60min后松解肺門結(jié)扎線，缺血肺再灌注120min；IPC組：麻醉平穩(wěn)后，左肺先予以10min缺血和10min的再灌注(預(yù)處理)兩次，然后重復(fù)IR組實(shí)驗(yàn)；IPC+PDTC組：IPC前15min靜脈注射。PDTC 10mg/kg，然后按IPC組完成實(shí)驗(yàn)。各組均于麻醉平穩(wěn)、肺缺血60min即刻，再灌注后30min、60min、120

3、min 5個(gè)時(shí)間點(diǎn)采動(dòng)脈血進(jìn)行血?dú)夥治?，并?jì)算肺換氣功能指標(biāo)；術(shù)后取左下肺組織1.0cm×1.0cm×1.0cm進(jìn)行肺實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡、NF-κb蛋白表達(dá)水平檢測(cè)及肺組織病理學(xué)檢查；剩余左下肺組織進(jìn)行肺濕干比重檢測(cè)。 結(jié)果：各組麻醉平穩(wěn)即刻血?dú)夥治鼋Y(jié)果顯示氧和指數(shù)、肺泡-動(dòng)脈血氧分壓差(A-aO<,2>)均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。肺缺血60min即刻、缺血再灌注后30min、60min和120min，IPC組和IPC+PDTC

4、組氧和指數(shù)均顯著高于IR組，同時(shí)A-aO<,2>顯著低于IR組(P<0.05、P<0.05、P<0.01、P<0.01)；再灌注后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)氧和指數(shù)IPC+PDTC比IPC組增高，A-aO<,2>IPC組及IPC+PDTC組相比后者低于IPC組 (P<0.05、P<0.05、P<0.01)。手術(shù)后肺組織濕干比重檢測(cè)顯示IR、IPC、IPC+PDTC組分別為5.2583±0.1365、3.9235±0.1324、3.3065±0.1485

5、，IPC組和IPC+PDTC組低于IR組(均為P<0.01)；IPC+PDTC組較IPC組低(P<0.05)。肺實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡率IR、IPC、IPC+PDTC組分別為(22.50±1.24)％、(12.69±0.56)％、(7.79±0.47)％、IR組與IPC組和IP+PDTC組比較有顯著差異(P<0.01、P<0.01)，IPC+PDTC組與IPC組比較亦有差異(P<0.05)。 肺實(shí)質(zhì)細(xì)胞NF-кbp65蛋白陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率分

6、別為IR組(55.2±0.55)％、IPC組(43.3±0.33)％、IPC+PDTC組(33.2±0.48)％。IPC組、IPC+PDTC組與IR組比較NF-кbp65蛋白陽(yáng)性表達(dá)有顯著性差異(均為P<0.01)，而IPC組與IPC+PDTC組比較亦有差異(P<0.05)。 病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)IR組肺組織內(nèi)有大量中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞積聚，毛細(xì)血管淤血，肺泡水腫明顯，間隔增寬，肺泡塌陷，肺泡細(xì)胞失去正常結(jié)構(gòu)；而IPC組標(biāo)本可見少