BMP2轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)老年大鼠骨缺損.pdf

1、研究目的 觀察增齡對(duì)大鼠骨髓MSC s的數(shù)量、以及外周血和股骨皮質(zhì)中BMP2含量的影響,分析MSCs數(shù)量和BMP2含量變化與老年人骨量丟失及老年性骨質(zhì)疏松間的相互關(guān)系.比較BMP2基因修飾的不同年齡來(lái)源的MSC s的BMP2分泌能力及成骨分化能力.在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用BMP2基因修飾的自體MSCs與TCP載體復(fù)合后修復(fù)老年大鼠股骨節(jié)段性骨缺損.研究方法1取三種年齡層次的Wi star大鼠各6只,幼年(4齡周)、成年(9-12月齡)、老年(2

2、4月齡),計(jì)算其骨髓MSCs數(shù)量,應(yīng)用ELISA技術(shù)定量檢測(cè)其外周血中及股骨皮質(zhì)骨中BMP2的含量.2通過(guò)Adv-hBMP2基因不同年齡來(lái)源的MSC s,觀察它們之間成骨分化能力的差別.4周齡、9月齡及24月齡大鼠的MSCs在體外培養(yǎng)、擴(kuò)增、Adv-hBMP2基因轉(zhuǎn)染后,定量檢測(cè)hBMP2的表達(dá)和成骨細(xì)胞型標(biāo)志蛋白如堿性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型膠原(COLL I)、骨橋素(OPN)、骨涎蛋白的表達(dá)(BSP)的表達(dá).同時(shí)檢測(cè)了MSC s/T

3、CP復(fù)合物在裸鼠體內(nèi)成骨能力的差別.3老年大鼠MSCs經(jīng)體外分離、培養(yǎng)、Adv-BMP2基因(試驗(yàn)組)或Adv-gal基因(對(duì)照組)轉(zhuǎn)染,檢測(cè)BMP2的表達(dá)及成骨細(xì)胞顯型蛋白如ALP、COLL I、OPN、BSP的表達(dá).與TCP復(fù)合后,植入體內(nèi)修復(fù)老年大鼠自體股骨節(jié)段性骨缺損,通過(guò)放射學(xué)及組織學(xué)進(jìn)行檢測(cè).結(jié)論1骨髓中MSC s的數(shù)量、外周血及皮質(zhì)骨中BMP2的含量均隨增齡而減少,可能是老年骨量丟失與老年性骨質(zhì)疏松發(fā)病的重要原因.2經(jīng)BM