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1、該文擬克隆Hp的ureB和vacA基因并構(gòu)建表達(dá)系統(tǒng),其產(chǎn)物將作為Hp基因工程疫苗的抗原,為Hp基因工程疫苗的研制奠定基礎(chǔ).結(jié)論:Hp vacA和ureB基因擴(kuò)增片段T-A克隆后,其測(cè)序結(jié)果與GeneBank登錄的相應(yīng)序列比較,所擴(kuò)增的vacA基因的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分別為100﹪和100﹪,所擴(kuò)增的ureB基因的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分別為97.86﹪和99.82﹪,并均有完整和正確的閱讀框架.上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,我們成
2、功地從Hp基因組DNA中擴(kuò)增、克隆了vacA和ureB基因.經(jīng)酶切鑒定、核苷酸序列分析的結(jié)果證實(shí),我們成功地構(gòu)建了Hp vacA和ureB基因的原核表達(dá)載體pGEX-5X-vacA和pGEX-5X-1-ureB及其相應(yīng)的表達(dá)系統(tǒng).SDS-PAGE結(jié)果證實(shí),pGEX-5X-vacA和pGEX-5X-1-ureB工程菌能表達(dá)GST-vacA和GST-ureB融合蛋白.Western Blot結(jié)果證實(shí),GST-vacA和GST-ureB融合蛋
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