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1、目的:幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)是一種全世界范圍的人類感染病原菌,對人類健康構(gòu)成嚴(yán)重危害.該研究擬通過生物信息學(xué)方法和體外尿素酶活性中和試驗(yàn)篩選穩(wěn)定的能夠替代全長尿素酶B(UreB)亞單位的活性片段,在此基礎(chǔ)上將片段與另外兩個已確定的Hp保護(hù)抗原成分熱休克蛋白A(HspA)、鞭毛粘附素蛋白A(HpaA)構(gòu)建融合基因.通過不同表達(dá)系統(tǒng)得到多亞單位的蛋白和基因疫苗,分別觀察在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)的不同免疫應(yīng)答和保護(hù)作
2、用,為揭示Hp潛在的保護(hù)性機(jī)制以及新型多亞單位Hp疫苗的研制提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù).結(jié)論:1、通過理論預(yù)測及尿素酶體外中和試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)得到性質(zhì)穩(wěn)定能夠替代全長尿素酶B亞單位的活性片段UreB414.2、重組融合蛋白經(jīng)口服免疫后激發(fā)的為一種Th<,1>、Th<,2>平衡的免疫應(yīng)答模式小鼠免疫應(yīng)答,攻毒保護(hù)試驗(yàn)取得89.6﹪的保護(hù)率.融合蛋白組小鼠的攻毒保護(hù)率顯著高于單一蛋白組(p=0.0283).3、Hp多亞單位融合基因DNA疫苗肌肉注射免疫小鼠
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