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文檔簡介
1、目的:構建幽門螺桿菌(H. pylori)中性粒細胞激活蛋白(HP-NAP)口服DNA疫苗,評價其免疫治療作用.方法:PCR擴增全長napA(編碼HP-NAP),測序并同源性分析后,亞克隆入真核表達載體pIRES,雙酶切并PCR鑒定.將重組質粒pIRES-napA轉化減毒鼠傷寒沙門菌SL7207,口服接種H. pylori感染的BALB/c小鼠,觀察其免疫治療作用.結果:PCR擴增一435bp產物,核苷酸序列測定及BLAST分析表明,所
2、克隆序列與GenBank中H. pylori悉尼株(SS1)napA核苷酸及蛋白質同源性均為98﹪.ANTHEPROT及DNAStar-ProteanTM軟件預測其蛋白質具有良好的抗原性.經PCR及雙酶切鑒定,證實成功構建了攜帶napA的重組質粒pIRES-napA及重組減毒鼠傷寒沙門菌疫苗株.治療組口服疫苗免疫后4周75﹪(3/4)小鼠快速尿素酶試驗轉為陰性,對照組均陽性(P=0.048).結論成功構建了具良好免疫治療作用的HP-NA
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