胰島素樣生長因子-Ⅰ對大鼠髁突軟骨細胞調控的實驗研究.pdf

1、上海交通大學碩士學位論文 1 前言 前言 下頜骨不對稱畸形是頜面部常見的畸形之一， 其成因主要是雙側顳下頜關節(jié)受咬合干擾，受力不均最終導致下頜骨髁突改建[1]。 作為顳下頜關節(jié)的重要組成部分， 髁突軟骨處于顳下頜關節(jié)應力敏感區(qū)， 是下頜骨發(fā)育重要的調節(jié)位點， 其發(fā)育異常可引起下頜骨發(fā)育不足或發(fā)育過度， 導致頜面部畸形[2]。由于髁突軟骨的生長速率及方向具有可塑性，并且決定著下頜骨生長的長度和高度， 使其一直成為研究熱點， 研究出生后下頜

2、骨髁突早期的生長發(fā)育對于探討各種頜面部畸形的發(fā)病機制有著重要的臨床指導意義。 1987 年 Karlberg[3]提出了 ICP（infancy-childhood-puberty）生長模型，它是通過人群連續(xù)生長指標經過統(tǒng)計分析得出的一個數(shù)理模型。 該模型將人的線性生長分為三個連續(xù)、部分重疊的時期，即嬰兒期（妊娠中期-3~4 歲） 、兒童期（0.5 歲-青春期） 、青春期。 “嬰兒期”除了受營養(yǎng)因素影響，和 IGFs 作用密切相關[4]

3、， “兒童期”基本反映的是生長激素對生長的影響作用，而這個作用是通過 IGF-Ⅰ軸來調節(jié)的。研究證實 IGF-I 在胚胎期就已存在，Leger 等[5]發(fā)現(xiàn)出生后 5 天，人體內 IGF-I 水平顯著下降，且體重與血清 IGF-I 含量正相關，Juul等[6]認為 IGF-I 水平持續(xù)下降至出生后六個月，此后緩慢增加，至青春期達到最高峰值。成年后，血清 IGF-I 含量及 IGF-I/IGFBP3 比值呈下降趨勢[4]。 與全身增長速率

4、一致，髁突軟骨亦呈線性生長。在生長發(fā)育期，雙側髁突軟骨發(fā)育過度比較少見， 單側在兒童期的發(fā)生率最高， 因此它常引起髁突的真性發(fā)育異常[2]，而 IGF-I 在髁突軟骨生理性及病理性發(fā)育中的變化趨勢尚未見報道。 本課題選取 SD 鼠為實驗動物，鼠類的青春期緊接斷乳期，通常大鼠的生長時間稍晚于小鼠，大鼠 13~16 天睜眼，睜眼后開始少量啃咬固體食物，4~5 周時完全斷奶，12~14 周為快速生長期，到 6 月時停止生長。Gabriel 等

5、[7]提出 SD 大鼠青春前期在出生后 28~32 天之間，青春早期在 33~40 天，青春后期在 41~54天。因此綜合上述，本課題的研究對象選取出生后 1d、7d、14d、28d SD 大鼠的髁突軟骨， 代表嬰兒期-兒童期-青春前期的發(fā)育過程， 以此來探究 IGF-I 與出生上海交通大學碩士學位論文 3 從而分析 IGF-I 介導的 Bcl-2、Bax 信號通路與 MCC 細胞增殖、凋亡的關系，探討 IG IGF-I 介導的細胞凋

6、亡在 介導的細胞凋亡在髁突軟骨發(fā)育的 髁突軟骨發(fā)育的作用。 作用。 另一方面，在體外培養(yǎng)的髁突軟骨細胞中加入外源性重組 rIGF-I 引起髁突軟骨細胞內 IGF-I 表達上調后，應用 real-time PCR 技術，檢測 IGF-I 信號通路相關因子基因水平的量變，從而探討：1.不同發(fā)育階段， IGF-I 信號通路對髁突軟骨細胞增殖、 凋亡的影響程度及地位， 為以后下頜骨不對稱畸形基因靶向治療時機的選擇提供依據； 2.橫向比較： I

7、GF-I 信號通路的激活后引起哪些下游相關激酶、靶蛋白的變化；3.尋找可能與 IGF-I 通路相互作用的其他蛋白。 通過研究 IGF-I 在髁突軟骨發(fā)育過程中可能的信號轉導機制， 以及與其他蛋白的相互作用， 從而進一步完善髁突軟骨細胞發(fā)育相關的信號轉導機制圖譜， 有助于我們理解髁突軟骨的生長與發(fā)育， 為以后力學加載下髁突軟骨內 IGF-I 信號的變化， 及與其他因子信號網絡交互關系的實驗奠定基礎， 以此探討髁突軟骨細胞內力學傳導信號途