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1、目的: 研究不同濃度的人類重組胰島素樣生長(zhǎng)因子I(Rh IGF-I)對(duì)成骨細(xì)胞分泌骨形成蛋白-2(BMP-2)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的影響。 方法: (l) 將人成骨細(xì)胞MG-63傳代培養(yǎng),取第二代細(xì)胞加入24孔板培養(yǎng)。 (2) 實(shí)驗(yàn)組分別用含50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25ng/ml的RhIGF-I和2%BS的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng),對(duì)照組用含2%BS的DMEM
2、溶液培養(yǎng)。 (3) 培養(yǎng)24h后將各濃度細(xì)胞收集.4%多聚甲醛固定,-20℃凍存?zhèn)溆谩?(4) 設(shè)置50 ng/ml RhIGF-I干擾組細(xì)胞4組. (5) 在培養(yǎng)的第0h,12h,24h,48h分別收集各組細(xì)胞爬片,4%多聚甲醛固定,-20℃凍存?zhèn)溆谩?(6) 經(jīng)免疫組化處理,用Breasalier法評(píng)價(jià)結(jié)果。 結(jié)果: (l) 經(jīng)Rh IGF-I處理的細(xì)胞VEGF表達(dá)增強(qiáng),與對(duì)照組有顯著
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