2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoidarthritis,RA)是一種以滑膜炎和進(jìn)行性關(guān)節(jié)軟骨與骨質(zhì)破壞為主要特征的慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病。成纖維樣滑膜細(xì)胞(fibroblast-likesynoviocytes,FLS)增生與凋亡失衡并分泌各種炎癥因子在RA免疫發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。白介素32(interleukin32,IL-32)是新近發(fā)現(xiàn)的一種致炎細(xì)胞因子,IL-32γ是IL-32所有亞型中生物學(xué)活性最強(qiáng)的。有研究發(fā)現(xiàn)其

2、與RA的啟動(dòng)與進(jìn)展密切相關(guān),但它對(duì)RA-FLS生物學(xué)特性的影響尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過RNA干擾技術(shù)沉默IL-32γ基因研究IL-32γ對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS)增殖與凋亡的影響及其機(jī)制。
  方法:體外無菌條件下分離培養(yǎng)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS);設(shè)計(jì)合成IL-32γ的靶向siRNA,用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染RA-FLS細(xì)胞;RT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)IL-32γ的表達(dá);Western印跡法檢測(cè)周期

3、蛋白D1(cyclinD1)及蛋白激酶B(p-Akt)的表達(dá);MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期;TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
  結(jié)果:①針對(duì)IL-32γ序列1、2和3的siRNA均能有效抑制FLS的IL-32γ的表達(dá)。②MTT法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組在接種后3天和5天的細(xì)胞數(shù)量均明顯少于對(duì)照質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組。③實(shí)驗(yàn)組處于G1期的細(xì)胞比例為(88.1±6.2)%,較對(duì)照質(zhì)粒組(68.6±4.6)%和未轉(zhuǎn)染

4、組(67.9±4.4)%顯著為高(均P<0.05);處于S+G2期的細(xì)胞比例為(13.6±3.0)%,較對(duì)照質(zhì)粒組(30.2±4.1)%和未轉(zhuǎn)染組(32.1±4.3)%顯著為低(均P<0.01)。④實(shí)驗(yàn)組凋亡率為(20.5±3.21)%,較對(duì)照質(zhì)粒組(9.2±0.32)%和未轉(zhuǎn)染組(8.6±0.22)%顯著為高(均P<0.01)。⑤實(shí)驗(yàn)組cyclinD1和p-Akt的表達(dá)明顯低于對(duì)照質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組。
  結(jié)論:IL-32γ的靶向

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