油酰乙醇胺對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展進(jìn)程的作用研究.pdf

1、研究背景:動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是現(xiàn)在世界范圍內(nèi)最普遍存在的嚴(yán)重威脅人類健康的心血管疾病之一。隨著肥胖和糖尿病患病人口比例的不斷上升,由動(dòng)脈粥樣硬化引起的心血管疾病如冠心病(CHD)等已經(jīng)成為全球人口死亡的主要原因。冠狀動(dòng)脈的粥樣硬化的情況也已經(jīng)成為臨床上考察心血管系統(tǒng)是否健康的重要檢測(cè)項(xiàng)目。因此,尋找動(dòng)脈粥樣硬化藥物的研究成為國(guó)內(nèi)外藥物研究的熱點(diǎn)。
　　 很多學(xué)者認(rèn)為,動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展進(jìn)程從童年就已經(jīng)開始了,它緩慢且不易察覺(jué)的

2、發(fā)展,直到我們步入中年時(shí)才表現(xiàn)出癥狀。肥胖、高血壓、高脂血癥和糖尿病等代謝紊亂疾病是動(dòng)脈粥樣硬化誘發(fā)的主要因素。而動(dòng)脈粥樣硬化頑固斑塊一旦形成,則很難將其清除根治。所以,對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防就顯得尤為重要。
　　 PPAR-α能調(diào)控能量代謝、抑制炎癥反應(yīng)、和保護(hù)內(nèi)皮功能,與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),故而成為防治動(dòng)脈粥樣硬化的重要研究靶點(diǎn),目前PPAR-α的合成配體己成為臨床治療心血管疾病的一線藥物。因此,OEA作為PPAR

3、-α的內(nèi)源性配體,其抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用亟待研究。
　　 目的:探討OEA對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展進(jìn)程中各個(gè)環(huán)節(jié)的作用、相關(guān)機(jī)制及其動(dòng)物模型中的作用效果。方法:采用ox-LDL誘導(dǎo)HUVEC非正常增值及凋亡、VSMC遷移和巨噬細(xì)胞內(nèi)炎性反應(yīng);采用大鼠動(dòng)脈球囊拉傷致粥樣硬化模型及ApoE敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型;使用Annexin V/PI染色和流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)OEA對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用;使用CCK-8試劑盒檢測(cè)OEA

4、對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞非正常增值的作用;使用transwell小室檢測(cè)OEA對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞遷移的作用;使用熒光定量PCR技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)OEA在體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中對(duì)PPAR-α、M-CSF、TNF-α、IL-6、iNOS和COX-2等基因mRNA和蛋白表達(dá)的影響;使用石蠟切片、H-E染色法檢測(cè)OEA對(duì)動(dòng)物模型腹主動(dòng)脈組織病變的作用;使用油紅O染色法直觀檢測(cè)OEA對(duì)ApoE敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的作用;

5、使用化學(xué)反應(yīng)試劑盒檢測(cè)檢測(cè)OEA對(duì)動(dòng)物模型血清中總膽固醇、甘油三酯、LDL、HDL、ox-LDL及TNF-α的作用。結(jié)果:本論文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,OEA能夠顯著抑制由ox-LDL誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的非正常增殖和凋亡;同時(shí),OEA能夠抑制ox-LDL誘導(dǎo)的大鼠血管平滑肌細(xì)胞遷移;在巨噬細(xì)胞中,ox-LDL能夠誘導(dǎo)TNF-α、CRP、M-CSF、IL-6、iNOS及COX-2的表達(dá)升高,PPAR-α表達(dá)降低,OEA能夠逆轉(zhuǎn)這些變化,且OEA