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1、目的:研究油酰乙醇胺(Oleoylethanolamide,OEA)的抗抑郁作用及其可能的作用機(jī)制。
方法:1小鼠隨機(jī)分為:空白對(duì)照組、氯米帕明組(10 mg/kg)、OEA組(1.5,3,6 mg/kg),連續(xù)灌胃給藥7天,采用小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)、小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、open-field實(shí)驗(yàn),以小鼠不動(dòng)時(shí)間、自主活動(dòng)數(shù)作為評(píng)價(jià)指標(biāo),觀察OEA的抗抑郁作用。
2小鼠隨機(jī)分為:空白對(duì)照組、模型組、氯米帕明組(5 mg/kg)、
2、OEA組(1.5,3,6 mg/kg),除空白對(duì)照組外,其余5組小鼠經(jīng)歷4周慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激,建立慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激模型(Chronic unpredicted mild stress,CUMS),各組小鼠造模1周后均灌胃給藥3周,于實(shí)驗(yàn)前1 d、實(shí)驗(yàn)第7、14、21、28天測(cè)量小鼠體重,并進(jìn)行open-field實(shí)驗(yàn)、糖水消耗實(shí)驗(yàn)、肛溫檢測(cè)、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,小鼠眼球取血、取腦、取左右腎上腺。
3、 3通過(guò)檢測(cè)小鼠腦組織中5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、去甲腎上腺素(Noradrenaline,NE)、單胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)并結(jié)合抑制單胺(去甲腎上腺素)重?cái)z取實(shí)驗(yàn)、利血平實(shí)驗(yàn),研究其抗抑郁的作用機(jī)制。
4.通過(guò)檢測(cè)小鼠腎上腺指數(shù)和小鼠血漿中促腎上腺皮質(zhì)激素(adreno-cortico-tropic-hormone,ACTH)、皮質(zhì)醇(corticost
4、erone,CORT)的含量,研究其抗抑郁的作用機(jī)制。
結(jié)果:(1)小鼠懸尾實(shí)驗(yàn),與空白對(duì)照組比較,OEA組(6 mg/kg)和氯米帕明組(10 mg/kg)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間均顯著縮短(P<0.05)。小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn),與空白對(duì)照組比較,OEA組(6 mg/kg)和氯米帕明組(10 mg/kg)小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間均顯著縮短(P<0.05)。小鼠open-fi eld實(shí)驗(yàn),與空白對(duì)照組比較,氯米帕明組(10 mg/kg)和OE
5、A(1.5,3,6 mg/kg)各劑量組均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
(2) CUMS模型小鼠體重監(jiān)測(cè),空白對(duì)照組小鼠在第7天、14天、21天、28天,體重呈逐步增加的趨勢(shì)。氯米帕明組(5 mg/kg)及OEA各劑量組小鼠在第7、14、21、28天與空白對(duì)照組比較,體重增加緩慢,實(shí)驗(yàn)第21天,與空白對(duì)照組比較,模型組和OEA組(1.5 mg/kg)小鼠體重顯著降低(P<0.05);實(shí)驗(yàn)第28天,與空白對(duì)照組比較,模型組和O
6、EA組(1.5 mg/kg)小鼠體重顯著降低(P<0.05),與模型組比較,OEA組(6 mg/kg)小鼠體重顯著升高(P<0.05)。open-field實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)第2l天,與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠直立次數(shù)顯著降低(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)第28天,與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠水平跨格數(shù)和直立次數(shù)均顯著降低(P<0.05);與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)小鼠的水平跨格數(shù)和直立次數(shù)均顯著升高(P<0.05),OEA組(1.
7、5,3,6 mg/kg)小鼠的水平跨格數(shù)和直立次數(shù)均顯著增加(P<0.05)。糖水消耗實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)第21天,與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠的絕對(duì)蔗糖飲水量顯著降低(P<0.05);實(shí)驗(yàn)第28天,與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠的絕對(duì)蔗糖飲水量顯著降低(P<0.05),與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)和OEA組(6mg/kg)小鼠的絕對(duì)蔗糖飲水量顯著升高(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)第21天,與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠的相對(duì)蔗糖飲水量明顯降
8、低,但無(wú)顯著性差異,與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)和OEA各劑量組的相對(duì)蔗糖飲水量都有升高,但無(wú)顯著性差異;實(shí)驗(yàn)第28天,模型組小鼠相對(duì)蔗糖飲水量與空白對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05),氯米帕明組(5mg/kg)和OEA組(6mg/kg)小鼠相對(duì)蔗糖飲水量與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)。CUMS模型肛溫檢測(cè)中,實(shí)驗(yàn)第21天,與空白對(duì)照組比較,模型組與OEA組(1.5mg/kg)小鼠肛溫顯著降低(P<0.05)
9、;實(shí)驗(yàn)第28天,與空白對(duì)照組比較,模型組、OEA(1.5mg/kg)和OEA(3mg/kg)小鼠肛溫顯著降低(P<0.05),與模型組比較,氯米帕明組(5mg/kg)和OEA組(6 mg/ kg)小鼠肛溫顯著升高(P<0.05)。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)第21天,與模型組比較,空白對(duì)照組、OEA組(6 mg/kg)小鼠的逃避潛伏期明顯縮短(P<0.05);實(shí)驗(yàn)第28天,與空白對(duì)照組比較,模型組和OEA組(1.5 mg/kg)小鼠的
10、逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(P<0.05),與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)和OEA組(6 mg/kg)小鼠的逃避潛伏期明顯縮短(P<0.05)。
(3)小鼠腦組織中單胺類(lèi)遞質(zhì)水平檢測(cè)結(jié)果表明,與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)與OEA組(6 mg/kg)去甲腎上腺素(NE)含量明顯升高(P<0.05);與空白對(duì)照組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)、OEA組(3 mg/kg)和OEA組(6 mg/kg)5-羥色胺(
11、5-HT)含量明顯升高(P<0.05)。利血平拮抗小鼠體溫下降實(shí)驗(yàn)中,與空白對(duì)照組相比,氯米帕明組(10 mg/kg)在3h、4h、5h以及OEA組(6 mg/kg)在4h、5h均能顯著拮抗利血平誘發(fā)的小鼠體溫降低(P<0.05)。通過(guò)檢測(cè)腦內(nèi)單胺氧化酶(MAO)發(fā)現(xiàn),與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠腦內(nèi)MAO含量顯著升高(P<0.05);與模型組比較,OEA組(6 mg/kg)小鼠腦內(nèi)的MAO含量顯著降低(P<0.05)。
(4
12、)在OEA對(duì)CUMS模型小鼠HPA軸影響的實(shí)驗(yàn)中,主要進(jìn)行了3方面的檢測(cè):腎上腺重量(絕對(duì)重量和相對(duì)重量)、血清中ACTH、CORT的含量。結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)第28天,與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠的腎上腺絕對(duì)重量和腎上腺相對(duì)重量均顯著升高(P<0.05),與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)和OEA組(6 mg/kg)小鼠的腎上腺絕對(duì)重量顯著降低(P<0.05),氯米帕明組(5 mg/kg)、OEA組(3 mg/kg)和OEA組(6
13、mg/kg)小鼠的腎上腺相對(duì)重量顯著降低(P<0.05);與空白對(duì)照組比較,模型組CORT含量明顯升高(P<0.05),與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)、OEA組(3 mg/kg)和OEA組(6 mg/kg)CORT含量明顯降低(P<0.05);同樣,與空白對(duì)照組比較,模型組ACTH含量明顯升高(P<0.05),與模型組比較,氯米帕明組(5 mg/kg)、OEA(3 mg/kg)組和OEA(6 mg/kg)組的ACTH含量明顯
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