油酰乙醇胺對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞的增殖的影響.pdf

1、研究背景:動脈粥樣硬化(AS)是以免疫活動為特征的慢性炎癥疾病,其易發(fā)生斑塊破裂和血栓形成,引起一系列心血管事件,嚴(yán)重危害人類健康。血管內(nèi)多種細(xì)胞如血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞都參與AS的發(fā)生發(fā)展過程,血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的增殖和遷移是血管再狹窄和動脈粥樣硬化發(fā)展形成過程中的重要部分。
　　 PPAR-α與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展緊密相連,不僅是由于它跟脂質(zhì)代謝,糖類代謝密切相關(guān),而且還由于其抗炎和抗增殖作

2、用。油酰乙醇胺(OEA)是一種天然的脂肪酸乙醇胺,已有研究表明,OEA是PPAR-α的一個高親和天然配體。實驗發(fā)現(xiàn),OEA可以通過激活PPAR-α受體從而發(fā)揮降血糖血脂、血管內(nèi)皮的保護(hù)、腦缺血的保護(hù)和抗炎性等多種作用,但是對細(xì)胞增殖方而作用,尚未見報道。
　　 目的:本論文的目的在于探討油酰乙醇胺對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)刺激大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)增殖的抑制作用以及對p38MAPK信號通路的影響,為闡明PPAR-

3、α在動脈粥樣硬化中作用提供理論依據(jù)。
　　 方法:分離大鼠胸主動脈,組織貼塊法培養(yǎng)VSMCs,AngⅡ刺激VSMCs建立細(xì)胞增殖模型,不同濃度OEA(5,10,20μmol/L)和非諾貝特(100μmol/L)作用后,用溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)摻入的方法檢測細(xì)胞增殖活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期變化;蛋白免疫印跡法(Westeill blotting)檢測對PPAR-α、p-p38和p38蛋白表達(dá)的影響。為了研究OEA的抑制增

4、殖作用機(jī)理,給與p38MAPK選擇性阻斷劑SB202190后,觀察OEA抗增殖和對p38MAPK通路影響作用。
　　 結(jié)果:與AngⅡ組比較,隨著OEA濃度升高,VSMCs的增殖受到抑制、G0/G1期比例顯著升高,G2/M期比例顯著降低,且p-p38蛋白的表達(dá)量降低并呈濃度依賴關(guān)系。且OEA在上調(diào)PPAR-α表達(dá)的同時能夠抑制p38 MAPK的磷酸化表達(dá)。加入p38MAPK選擇性阻斷劑,AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs增殖和p-p38表