l-NNA對酒精中毒家兔腦組織NOS活性及NOS陽性神經(jīng)元的影響.pdf

1、本試驗(yàn)用兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物制備慢性酒精中毒模型，一氧化氮合酶抑制劑L-NNA及納絡(luò)酮對成功模型進(jìn)行比較治療。通過測定不同組慢性酒精中毒家兔額葉、海馬、紋狀體中NOS的活性、NO水平，觀測NOS陽性神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)及分布來探討慢性酒精中毒腦損傷與NO的關(guān)系以及L-NNA對受損腦組織中NOS活性、NO水平的影響，為慢性酒精中毒腦損傷機(jī)制、病理學(xué)研究以及臨床治療提供理論依據(jù)。
　　通過酒精灌胃的方法建立家兔慢性酒精中毒模型，并通過體重、行為學(xué)

2、變化以及病理組織學(xué)確定家兔是否已經(jīng)造成腦組織損傷。酒精灌胃的家兔在6周后體重出現(xiàn)負(fù)增長，經(jīng)病理組織學(xué)觀察可知:在酒精灌胃8周時(shí)，酒精灌胃家兔腦組織出現(xiàn)輕微的神經(jīng)元缺失，隨著灌胃時(shí)間的增長，腦組織神經(jīng)元缺失加重，且有細(xì)胞溶解消失，海馬區(qū)錐體細(xì)胞排列紊亂，免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示nNOS及iNOS陽性神經(jīng)元在不同腦區(qū)的表達(dá)發(fā)生一定變化，進(jìn)一步驗(yàn)證了模型的可靠性。
　　利用硝酸還原酶法和生物化學(xué)檢測方法來分別檢測各組家兔額葉、海馬、紋狀體內(nèi)

3、的NOS活性變化及NO水平變化。結(jié)果顯示:模型組家兔額葉、海馬及紋狀體中NOS活性一直保持上升趨勢，且在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對照組，NO含量變化與其相一致;給予納洛酮及L-NNA后，治療組各腦區(qū)NOS及NO水平均上升緩慢，給藥3d后均呈下降趨勢，14d后變化趨于平穩(wěn)，三組治療組不同腦區(qū)NOS活性及NO水平均顯著低于模型組。
　　利用SABC免疫組織化學(xué)法在光學(xué)顯微鏡下對各組家兔額葉、海馬各區(qū)以及紋狀體的nNOS陽性神經(jīng)元與iNOS

4、陽性神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀測。試驗(yàn)結(jié)果表明:各組兔腦組織內(nèi)nNOS和iNOS陽性神經(jīng)元的數(shù)量與NO的含量及NOS活性在腦組織中的變化趨勢基本一致。模型組、納洛酮組及L-NNA組中不同腦組織內(nèi)nNOS及iNOS陽性神經(jīng)元的表達(dá)顯著高于正常對照組，與酒精模型組相比，三組治療組腦內(nèi)NOS陽性神經(jīng)元的表達(dá)均有所降低，其中聯(lián)合治療組降低幅度最大。
　　結(jié)果表明:酒精模型組中額葉、海馬及紋狀體中的神經(jīng)元缺失、死亡伴隨相應(yīng)組織中NO含量的增加以