葡萄胎組織中IGF-Ⅱ、IGFBP-2、IGFBP-3的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、目的:妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病(gestational trophoblastic diseases,GTDs)是一組妊娠相關(guān)疾病,來(lái)源于胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞,包括葡萄胎、侵蝕性葡萄胎、絨毛膜癌及胎盤部位滋養(yǎng)細(xì)胞腫痛,后三者統(tǒng)稱為妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤(gestational trophoblastic tumor,GTT),是發(fā)生于生育年齡婦女的惡性程度很高的腫瘤,早期即可通過(guò)血液轉(zhuǎn)移,侵蝕性葡萄眙及大約50％的絨毛膜癌均由葡萄胎惡變所致。葡萄胎后發(fā)生絨毛

2、膜痛的危險(xiǎn)性比正常妊娠或流產(chǎn)后大2000～4000倍。葡萄胎屬良性疾病,但有一定的惡變傾向,與正常妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞相比,葡萄胎組織中的滋養(yǎng)細(xì)胞增生異?；钴S,臨床認(rèn)為對(duì)有惡變傾向的患者給予預(yù)防性化療可以改善預(yù)后。但葡萄胎惡變的相關(guān)因素及惡變機(jī)制尚不十分清楚,因此探討葡萄胎的惡變機(jī)制對(duì)預(yù)測(cè)葡萄胎惡變及指導(dǎo)臨床治療進(jìn)而改善患者預(yù)后有重要意義。
　　 胰島素樣生長(zhǎng)因子系統(tǒng)(insulin-like growth factor system,

3、IGFs)在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖,分化以及腫瘤發(fā)生中發(fā)揮著重要作用,該系統(tǒng)影響人和動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育及疾病的發(fā)生過(guò)程。包括2種多肽類生長(zhǎng)因子(IGF-Ⅰ和Ⅱ)、2類受體(IGF-ⅠR和-ⅡR)、6種密切相關(guān)的結(jié)合蛋白(IGFBP)與相應(yīng)的IGFBP蛋白酶。IGF-Ⅰ和-Ⅱ通過(guò)IGF-ⅠR調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂。體內(nèi)外研究表明,IGF-Ⅱ在役襲性滋養(yǎng)細(xì)胞中大量表達(dá),并刺激滋養(yǎng)細(xì)胞增殖,促進(jìn)其遷移及血管重鑄。IGF-Ⅱ與IGFBP-2的結(jié)合增強(qiáng)了滋養(yǎng)細(xì)胞的侵

4、襲性及遷移能力,IGFBP與結(jié)合蛋白酶共同調(diào)節(jié)血清及組織中IGF-Ⅰ和-Ⅱ的含量。本課題擬通過(guò)研究正常絨毛組織和葡萄胎組織中IGF-Ⅱ、IGFBP-2和IGFBP-3的表達(dá),探討IGF及其主要結(jié)合蛋白在滋養(yǎng)細(xì)胞疾病發(fā)病機(jī)理中的作用,從而為預(yù)測(cè)良性滋養(yǎng)細(xì)胞疾病惡變以及早期診斷提供依據(jù)。
　　 方法:收集河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院2004年1月-2008年1月婦產(chǎn)科病人首次清宮術(shù)后葡萄胎組織標(biāo)本50例,平均年齡為29.5±5.5歲。隨訪兩

5、年,未發(fā)生惡變的稱為葡萄胎未惡變組共36例,14例發(fā)生惡變的稱為葡萄胎惡變組。對(duì)照組絨毛組織取自2007年在河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院計(jì)劃生育門診行人工流產(chǎn)手術(shù)的正常早孕患者,平均年齡為26.5±5.5歲,采用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)PV法檢測(cè)所有標(biāo)本中IGF-Ⅱ、IGFBP-2和IGFBP-3的表達(dá)情況,并探討葡萄胎組織中IGF-Ⅱ、IGFBP-2、IGFBP-3表達(dá)的相關(guān)性。所有統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均應(yīng)用SPSS13

6、.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果:
　　 1臨床一般資料比較:各組間年齡、孕周的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2 IGF-Ⅱ在各組中的表達(dá):IGF-Ⅱ主要分布于絨毛小葉的合體滋養(yǎng)細(xì)胞及細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞,為細(xì)胞漿著色,陽(yáng)性染色均呈棕色、褐色。正常絨毛與葡萄胎未惡變組中表達(dá)均較弱,葡萄胎惡變組中IGF-Ⅱ可見(jiàn)強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。IGF-Ⅱ在正常對(duì)照組、葡萄胎未惡變組及葡萄胎惡變組中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為43.75％(

7、14/32)、69.44％(25/36)和100％(14/14)。三組之間存在顯著性差異(x2=14.131,P＜0.05)。正常早孕絨毛組與葡萄胎未惡變組及葡萄胎惡變組的IGF-Ⅱ表達(dá)水平兩兩比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 3 IGFBP-2在各組中的表達(dá):IGFBP-2在標(biāo)本中陽(yáng)性著色為細(xì)胞膜和細(xì)胞漿顆粒狀,主要分布于增生活躍的滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿,成纖維組織中偶有表達(dá)。正常絨毛與葡萄胎未惡變組織中表達(dá)均較弱,葡萄胎惡變組

8、中IGFBP-2細(xì)胞漿呈棕黃色沉淀,著色較深。IGFBP-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率在正常對(duì)照組、葡萄胎未惡變組及葡萄胎惡變組中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為34.375％(11/32)、61.11％(22/36)和92.86％(13/14)。三組之間存在顯著性差異(x2＝13.349 P＜0.01)。葡萄胎未惡變組與正常早孕絨毛組IGFBP-2表達(dá)差異,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),葡萄胎惡變組與葡萄胎未惡變組IGFBP-2表達(dá)水平差異,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

9、＜0.05)。
　　 4 IGFBP-3在各組中的表達(dá):IGFBP-3在標(biāo)本中陽(yáng)性染色主要為細(xì)胞漿著色,陽(yáng)性染色均呈棕色、黃色。主要分布于合體滋養(yǎng)細(xì)胞及細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞,成纖維組織中可見(jiàn)表達(dá)。正常絨毛與葡萄胎未惡變組織中表達(dá)較強(qiáng),著色較深,葡萄胎惡變組中IGFBP-3著色較淺。IGFBP-3在正常對(duì)照組、葡萄胎未惡變組及葡萄胎惡變組中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為75％(24/32)、66.67％(24/36)和28.57％(4/14),三組之

10、間存在顯著性差異(x2=9.341P＜0.01)。葡萄胎惡變組與正常早孕絨毛組IGFBP-3表達(dá)水平差異顯著(P＜0.05);葡萄胎未惡變組與正常早孕絨毛組IGFBP-3表達(dá)無(wú)顯著性差異P＞0.05、),葡萄眙惡變組與葡萄胎未惡變組IGFBP-3表達(dá)水平見(jiàn)顯著性差異(P＜0.05)。
　　 5 IGF-Ⅱ與IGFBP-2在葡萄胎組織中表達(dá)的相關(guān)性:在葡萄胎組織中(包括葡萄胎組與侵蝕性葡萄胎組),39例IGF-Ⅱ陽(yáng)性者有33例IG

11、FBP-2表達(dá)陽(yáng)性(84.62％),11例IGF-Ⅱ陰性者有2例IGFBP-2表達(dá)陽(yáng)性(18.18％),IGF-Ⅱ陽(yáng)性組IGFBP-2表達(dá)陽(yáng)性率與IGF-Ⅱ陰性組IGFBP-2表達(dá)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析表明二者無(wú)相關(guān)性(r=0.601,P＞0.05)。
　　 6 IGF-Ⅱ與IGFBP-3在葡萄胎組織中的表達(dá)相關(guān)性:在葡萄胎組織中(包括葡萄胎未惡變組與葡萄胎惡變組),39例IGF-Ⅱ

12、陽(yáng)性者有18例IGFBP-3表達(dá)陽(yáng)性(46.15％),11例IGF-Ⅱ陰性者有10例IGFBP-3表達(dá)陽(yáng)性(90.91％),IGF-Ⅱ陽(yáng)性組IGFBP-3表達(dá)陽(yáng)性率與IGF-Ⅱ陰性組IGFBP-3表達(dá)陽(yáng)性率差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析表明二者呈負(fù)相關(guān)(r=-0.373,P＜0.05)。
　　 結(jié)論:IGF-Ⅱ、IGFBP-2、IGFBP-3作為重要的生長(zhǎng)因子在葡萄胎的發(fā)生及惡變過(guò)程中發(fā)揮了

13、重要作用,葡萄胎組織中IGF-Ⅱ、IGFBP-2的表達(dá)明顯高于正常早孕絨毛組織,且隨著惡性程度的升高表達(dá)率也升高,而在葡萄胎未惡變組和惡變組中IGF-Ⅱ、IGFBP-2表達(dá)沒(méi)有相關(guān)性,提示IGF-Ⅱ可能以不依賴IGFBP-2的方式促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲、遷移,IGFBP-3在葡萄胎組較正常對(duì)照組表達(dá)率低,且隨著惡性程度的增高表達(dá)率下降,并且在葡萄胎組織中(包括葡萄胎未惡變組與葡萄胎惡變組)IGF-Ⅱ、IGFBP-3的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),IGFBP